- Разное

Приманка на рака: Эта приманка на раков шокировала даже опытных рыболовов

Содержание

наживка на рака в раколовку

наживка на рака в раколовку

наживка на рака в раколовку

>>>ПЕРЕЙТИ НА ОФИЦИАЛЬНЫЙ САЙТ >>>

Что такое наживка на рака в раколовку?

Верша – паук является специальным приспособлением, которое позволяет вести эффективную ловлю рыбы как на мелких водоемах с небольшой глубиной, так и на крупных реках или озерах.

Эффект от применения наживка на рака в раколовку

Рыболовная верша-паук — это орудие лова, состоящее из квадратного куска сетки натянутого между жёсткими металлическими прутьями каркаса, верхняя часть которого соединена в специально разработанное для этого приспособление, называющееся крестовина.

Мнение специалиста

В собранном виде конструкция верши чем – то напоминает паутину. Именно от этой ее особенности и произошло название – верша – паук. Ведь паучья сеть создана специально для того, чтобы эффективно ловить насекомых, а верша – паук работает примерно по такому же принципу и позволяет поймать большее количество рыбы за небольшой промежуток времени.

Как заказать

Для того чтобы оформить заказ наживка на рака в раколовку необходимо оставить свои контактные данные на сайте. В течение 15 минут оператор свяжется с вами. Уточнит у вас все детали и мы отправим ваш заказ. Через 3-10 дней вы получите посылку и оплатите её при получении.

Отзывы покупателей:

Nika

Уникальное приспособление, которое позволяет ловить больше рыбы чем на удочку. Главное преимущество данного способа в том, что рыба ловится сама – вам достаточно лишь добавить прикормку внутрь и опустить вершу под воду и раз в несколько часов вынимать из ловушки рыбу!

Варя

Использование такого приспособления как верша – паук является достаточно простым и не вызовет особых затруднений даже у начинающих рыболовов или людей, которые раньше никогда не пользовались такой снастью. Перед забросом верши в воду, сначала ее нужно подготовить к работе. Для этого одной рукой необходимо взять ее за верхнюю часть, а другой рукой – за шнурок. Потом шнурок необходимо потянуть таким образом, чтобы снасть раскрылась. Во время раскрытия верши нужно придерживать основание петли. После полного раскрытия снасти в нее нужно положить приманку, а потом забросить в воду.

Ловить рыбу на удочку это хороший способ поймать много добычи, однако, для не менее эффективного улова создано приспособление под названием верша – паук. Это изделие изобрели уже очень давно. Оно до сих пор не теряет своей популярности, но сейчас изготавливается в другом исполнении. В наше время современная верша производится из высококачественной нейлоновой сетки. Ее удобно транспортировать и использовать. Где купить наживка на рака в раколовку? В собранном виде конструкция верши чем – то напоминает паутину. Именно от этой ее особенности и произошло название – верша – паук. Ведь паучья сеть создана специально для того, чтобы эффективно ловить насекомых, а верша – паук работает примерно по такому же принципу и позволяет поймать большее количество рыбы за небольшой промежуток времени.

По вопросам приобретения раколовок обращайтесь по тел.: (098) 098-37-71 или (050) 953-68-58.Данная приманка работает на Video Duration: 9 minViews: 396KAuthor: Денис Билыкwww.youtube.com › watchСАМАЯ ЛУЧШАЯ ПРИМАНКА на РАКА в РАКОЛОВКУ. Ловля РАКОВ www.youtube.com › watch CachedПродажа раколовок в Украине (098) 098-37-71 – Viber(067) 562-23-81 (050) 953-68-58 — WhatsAppЕще одно видео от подписчиков.В этом видео Video Duration: 7 minViews: 9.8KAuthor: Денис БилыкImages View all manrule.ru › primanki-i-nazhivki › vidy-dlya-rakovПриманки для раков: прикормка в раколовку летом и зимой. На manrule.ru › primanki-i-nazhivki › vidy-dlya-rakov CachedПриманки на раков, их особенности и требования к ним. Какими бывают приманки. Прикормка в раколовку летом и зимой. Основу приманки, помещенной в раколовку, составляют: мясо рыбы, мясо животных или птицы, лягушки, кузнечики и т.д. Это те пищевые объекты, которые или водятся в водоеме или попадают в него. Опускают раколовку в водоем. Собираясь на корм, раки влезают на поверхность или внутрь сетки. Используя этот нехитрый прибор можно практически круглый год добывать отличные уловы раков. 4/5 (3)breedfish.ru › raki-kak-lovit-rakov-na-rakolovkuРаки — как ловить раков на раколовку, приманки, где ловить breedfish.ru › raki-kak-lovit-rakov-na-rakolovku CachedЕщё зимой ловить раков можно руками, не удивляйтесь, именно руками. Многие ловят раков поздней осенью на реках уровень воды в которых поддерживается гидросооружениями — шлюзами. Когда поздней осенью шлюза открывают и вода уходит — раки не успевшие уйти из нор Лучшей рыбой для приманки на рака считается лещ, карась и плотва. Щуку и окуня раки не очень любят, поэтому их лучше не использовать. Перед помещением рыбы в раколовку следует разрезать ее
http://neuroxl.com/images/chto_nuzhno_klast_v_rakolovku2466.xml
https://www.dnacenterthailand.com/image/upload/zimnie_rakolovki_cherez_lunku_kupit2787.xml
http://sccs.com.pl/upload/kakuiu_primanku_lozhat_v_rakolovku3675.xml
http://sananselmo.com/wysiwygfiles/kupit_rakolovki_v_belarusi_diametr_40_sm6295.xml
http://videofilm-tv.ru/content/pugachev_avito_rakolovki1114.xml
Рыболовная верша-паук — это орудие лова, состоящее из квадратного куска сетки натянутого между жёсткими металлическими прутьями каркаса, верхняя часть которого соединена в специально разработанное для этого приспособление, называющееся крестовина.
наживка на рака в раколовку
Верша – паук является специальным приспособлением, которое позволяет вести эффективную ловлю рыбы как на мелких водоемах с небольшой глубиной, так и на крупных реках или озерах.
РАКИ!!! Лучшие РАКОЛОВКИ и ПРИМАНКИ для ловли раков, топ приманок и раколовок! Сутки на тестирование Video Duration: 27 minViews: 22.8KAuthor: Классная рыбалка с Алексомmanrule.ru › primanki-i-nazhivki › dlya-rakovЛучшие приманки для раков: на что ловить их в раколовки и manrule.ru › primanki-i-nazhivki › dlya-rakov CachedПриманку для них следует выбирать такую, которая не размокнет достаточно быстро. Это жмых, мясо и рыба. В остальном приманки хватает до 3-х часов, после чего ее рекомендуется заменить свежей. Привет Друзья! ПОДПИСЫВАЙТЕСЬ НА МОЙ КАНАЛ и вы узнаете все Тонкости и Секреты Рыболовного Мастерства Video Duration: 14 minViews: 282.2KAuthor: FISHING PRO Геннадийpulse.mail.ru › article › 3-luchshie-primanki-dlya3 лучшие приманки для раков в раколовки | Мега Рыбак Пульс pulse.mail.ru › article › 3-luchshie-primanki-dlya CachedAug 27, 2021 · Три приманки от которых рак не откажется. Приветствую, рыбаки! Расскажу, что лучше положить в раколовки, а именно 3 лучшие приманки для раков. На какие приманки чаще всего идут раки? Рассмотрены варианты раколовок с фото. Приведено видео по ловле раков не только летом, но и зимой. Лучшие приманки в раколовки Не забываем о том, что для оснащения раколовок Вам

О ловле рака — Рыбалка

 Loading …

Не кажется ли вам, что из всех обитателей наших водоемов рак – самое необычное животное. Отшельник, живущий только в своей норке, выглядит как настоящее инопланетное существо — клинообразная голова, хитиновый покров–панцирь, длинные усы, выпуклые глазки-бусинки и веерообразный хвост. А главное его украшение – две ассиметричные клешни, которые служат ему защитой от врагов и орудием для прокорма. Предпочитает он чистые реки с каменистым дном, но встречается и в других пресных водоемах. На первый взгляд раки кажутся медлительными, но тот, кто хоть раз ловил раков, знают, какую приличную скорость они развивают при необходимости.

Ловля раков в наше время мало чем отличается от тех способов, которыми пользовались наши предки. Самый захватывающий и коллективный – ловля раков руками. Дедовский способ заключается в том, что надо медленно и осторожно передвигаться по дну водоема, поднимая коряги и камешки, ловко подхватывая добычу. Но, так как рак любит выбираться из укрытий с наступлением темноты, то поймать его в ночное время можно с помощью подсветки. Тогда удобнее применять вспомогательное орудие. Например, расщепленные на конце палки, сачки. Незабываемы картинки из детства, когда раков в водоемах ленинградской области водилось много. На берегу Гвардейского озера под Выборгом горит костер, кипит вода в котелке. А мы, шестилетние дети, освещая фонариком щели между камнями, поджидаем добычу с орудием для ловли. Смешно, но это были простые вилки, привязанные к палкам.

Не менее интересный способ — ловля раков на удочку. Используются палки с леской. Любимая приманка для рака – свежая рыба или лягушка. Когда рак схватит клешней за приманку, лежащую на дне речки, надо осторожно подтянуть добычу и подхватить сачком. Можно устанавливать сразу до десятка удилищ, располагая их в 5-10 м друг от друга.

Не сложным способом является и ловля раков с помощью сеток или рачевен. Здесь так же закрепляется приманка, рачевня с грузом опускается на дно и как только рак окажется в ловушке, добычу сразу вытаскивают. Можно использовать несколько снастей, привязывая их к шестам, воткнутым в берег.

Промысловым способом является ловля с помощью мережей. Они бывают двух видов – для установки на дно в лежачем и стоячем положении. Преимуществом этого способа является то, что установив снасть с приманкой, проверять постоянно наличие добычи необязательно. Один ловец может использовать хоть сотню мережей, так как пойманному раку из них практически не выбраться.

К сожалению раков в наших водоемах, в основном из-за загрязнения природы, становится все меньше. Не надо забывать, что их отлов можно производить только летом до начала осеннего спаривания. Поймав рака менее 10 см, необходимо его выпустить, чтобы он смог достигнуть размеров взрослой особи.

Комментировать статью «О ловле рака»


Рекомендуем к прочтению:

Раздел: Статьи

наживка на рака в раколовку

наживка на рака в раколовку

наживка на рака в раколовку

>>>ПЕРЕЙТИ НА ОФИЦИАЛЬНЫЙ САЙТ >>>

Что такое наживка на рака в раколовку?

Рыболовная верша паук позволяет ловить в разы больше рыбы и при этом прилагать минимум усилий. Верша имеет вид раскрытого купола зонта, легко погружается под воду. Вам остается лишь периодически вынимать рыболовецкую снасть и собирать улов.

Эффект от применения наживка на рака в раколовку

Шикарная вещь, я вам скажу. Просто всю жизнь такое приспособление называли “хапужка”. У моего папы есть такая. Изготавливал он ее сам. Но в нынешних условиях, когда сетка, и другие составляющие для изготовления, не такие уж и дешевые, выгоднее приобрести ее в готовом изделии. Придя на рыбалку, вершу-паука кладут в воду, а сами в это время ловят рыбу на удочку. И получается двойное удовольствие: и на берегу с удочкой посидел, и улов увеличил.

Мнение специалиста

У меня муж заядлый рыбак, но рыбу всегда ловил только на удочку – у него за несколько лет скопилась целая коллекция (друзья и родственники дарят ему их на каждый день рождения). А однажды принесли и подарили не понятную штуку – я долго не могла понять, что это – крутила, вертела в руках, а мужчины, собравшись в круг, смеялись на до мною, в конечном итоге мне объяснили, что это приспособление для ловли рыбы из далекого детства. Мой муж счастлив – сейчас он без особых усилий ловит столько рыбы, что ее хватает не только нам. но и всем нашим знакомым.

Как заказать

Для того чтобы оформить заказ наживка на рака в раколовку необходимо оставить свои контактные данные на сайте. В течение 15 минут оператор свяжется с вами. Уточнит у вас все детали и мы отправим ваш заказ. Через 3-10 дней вы получите посылку и оплатите её при получении.

Отзывы покупателей:

Аня

Мы таким пауком постоянно ловим на нашей речушке с пешеходного моста. Снасть наиболее эффективна при большом скоплении рыбы. Ее косяки хорошо видны с высоты моста , так как вода в реке чистая, а глубина небольшая. В хорошие дни мы приносили домой по два мешка рыбы, пойманной с помощью вот такого вот паука за пару часов. Ощущения, когда поднимаешь полную снасть рыбы, я вам скажу, просто непередаваемые. Паук можно забрасывать и с берега, особенно когда рыба идет на мелководье. В общем, каждый применяет снасть по своему усмотрению.

Kira

Недавно ездили сдрузьями на рыбалку и узнали новый метод ловли рыбы на вершу-паука. Очень я доволен своей рыбалкой. И отдохнул хорошо и рыбку домой хорошую поймал. В моем улове был и карась, и рак, и линей. Само устройство выполнено качественно и устанавливается легко. Свою первую добычу я получил очень быстро, даже на удочку так быстро не клюет. Рекомендую приспособление верша-паук всем, кто желает побывать на качественной рыбалке.

За счет того, что в конструкции Верши Паук целых десять входов, вместо привычного одного, то улов однозначно приятно удивит. Больше ни один рыбак не вернется с рыбалки без пойманной рыбы. Удовольствие от результата однозначно будет шикарным, и верша будет радовать каждый раз при использовании. Где купить наживка на рака в раколовку? У меня муж заядлый рыбак, но рыбу всегда ловил только на удочку – у него за несколько лет скопилась целая коллекция (друзья и родственники дарят ему их на каждый день рождения). А однажды принесли и подарили не понятную штуку – я долго не могла понять, что это – крутила, вертела в руках, а мужчины, собравшись в круг, смеялись на до мною, в конечном итоге мне объяснили, что это приспособление для ловли рыбы из далекого детства. Мой муж счастлив – сейчас он без особых усилий ловит столько рыбы, что ее хватает не только нам. но и всем нашим знакомым.
По вопросам приобретения раколовок обращайтесь по тел.: (098) 098-37-71 или (050) 953-68-58.Данная приманка работает на Video Duration: 9 minViews: 396KAuthor: Денис Билыкwww.youtube.com › watchСАМАЯ ЛУЧШАЯ ПРИМАНКА на РАКА в РАКОЛОВКУ. Ловля РАКОВ www.youtube.com › watch CachedПродажа раколовок в Украине (098) 098-37-71 – Viber(067) 562-23-81 (050) 953-68-58 — WhatsAppЕще одно видео от подписчиков.В этом видео Video Duration: 7 minViews: 9.8KAuthor: Денис БилыкImages View all manrule.ru › primanki-i-nazhivki › vidy-dlya-rakovПриманки для раков: прикормка в раколовку летом и зимой. На manrule.ru › primanki-i-nazhivki › vidy-dlya-rakov CachedПриманки на раков, их особенности и требования к ним. Какими бывают приманки. Прикормка в раколовку летом и зимой. Основу приманки, помещенной в раколовку, составляют: мясо рыбы, мясо животных или птицы, лягушки, кузнечики и т.д. Это те пищевые объекты, которые или водятся в водоеме или попадают в него. Опускают раколовку в водоем. Собираясь на корм, раки влезают на поверхность или внутрь сетки. Используя этот нехитрый прибор можно практически круглый год добывать отличные уловы раков. 4/5 (3)breedfish.ru › raki-kak-lovit-rakov-na-rakolovkuРаки — как ловить раков на раколовку, приманки, где ловить breedfish.ru › raki-kak-lovit-rakov-na-rakolovku CachedЕщё зимой ловить раков можно руками, не удивляйтесь, именно руками. Многие ловят раков поздней осенью на реках уровень воды в которых поддерживается гидросооружениями — шлюзами. Когда поздней осенью шлюза открывают и вода уходит — раки не успевшие уйти из нор Лучшей рыбой для приманки на рака считается лещ, карась и плотва. Щуку и окуня раки не очень любят, поэтому их лучше не использовать. Перед помещением рыбы в раколовку следует разрезать ее
http://www.al-bandak.com/userfiles/rakolovki_kupit_v_sankt_peterburge8175.xml
http://zagmir.com/uploads/rakolovki_8_vkhodov5360.xml
http://tsolisp.com/files/rakolovka_pruzhina6422.xml
http://www.sarkar.ie/userfiles/rakolovki_zakon5800.xml
http://www.4ci.com/userfiles/rakolovka_metallicheskaia5591.xml
Шикарная вещь, я вам скажу. Просто всю жизнь такое приспособление называли “хапужка”. У моего папы есть такая. Изготавливал он ее сам. Но в нынешних условиях, когда сетка, и другие составляющие для изготовления, не такие уж и дешевые, выгоднее приобрести ее в готовом изделии. Придя на рыбалку, вершу-паука кладут в воду, а сами в это время ловят рыбу на удочку. И получается двойное удовольствие: и на берегу с удочкой посидел, и улов увеличил.
наживка на рака в раколовку
Рыболовная верша паук позволяет ловить в разы больше рыбы и при этом прилагать минимум усилий. Верша имеет вид раскрытого купола зонта, легко погружается под воду. Вам остается лишь периодически вынимать рыболовецкую снасть и собирать улов.
В поисках древних артефактов! https://www.youtube.com/channel/UCz5-FTXv3RU1NTMR2QdwqeA/videos Video Duration: 9 minViews: 914.3KAuthor: rystem sibagatyllinfishingday.org › lovlya-rakov-rakolovkamiЛовля раков раколовками: техника ловли, виды раколовок fishingday.org › lovlya-rakov-rakolovkami CachedЛовля раков на раколовки летом(Дневник рыболова). Купить можно у него : https://vk.com/id468126955Как доработать Раколовку смотрите здесь : https://www.youtube.com Video Duration: 13 minViews: 1.4MAuthor: FISHING PRO Геннадийrybalka.guru › poleznye-stati › lovlja-rakov-naЛовля раков на раколовки: где, когда и как ловить? rybalka.guru › poleznye-stati › lovlja-rakov-na CachedFeb 06, 2022 · Ловля раков на китайские раколовки менее эффективна, чем на самодельные устройства, но при правильном выборе и использовании все равно обеспечивает уловом. Ловля раков на раколовки: особенности и описание ловушки. Как правильно выбрать место и время, чтобы поймать много раков?. На поведении раков это сказывается слабо, особенно если стоят ясные погожие дни, а вот охотник за ними может всерьез пострадать от длительного пребывания в холодной воде. Раколовки бывают открытого и закрытого типа. Устанавливать лучше под крутыми берегами на глинистом дне. Приманки используют свежие: рыбу, хлеб, мясо.

🚩 Как ловить раков зимой: все про особенности ловли

Зима может порадовать рыбака не только ловлей рыбы на льду, но и ловлей раков. Принципиальных отличий между ловом пресноводных раков зимой и летом нет, но определенные особенности надо учитывать, чтобы улов порадовал.

Сезон ловли раков

Определить удачный сезон для ловли раков бывает затруднительно, потому что климат меняется ежегодно. На клев влияют различные внешние факторы, такие как температура и осадки.

© Laures — depositphotos.com

Особенность состоит в том, что сезон ловли раков не имеет выраженного начала и конца.

Радоваться хорошему улову раков можно в период с ноября по июль. Особенно удачным считают период теплой и влажной зимы. Наиболее удачные месяцы, когда можно поймать действительно крупных и мясистых раков – февраль-май.

Рекомендуем просмотреть нашу прошлую публикацию и узнать, каких раков можно ловить, а какие находятся под охраной.

Особенности поведения раков зимой

Всем известно сто раки водятся в чистых водоемах, содержание кислорода в которых значительно выше, чем в загрязненных. Обязательно наличие бьющих ключей на дне водоема. Зимой раки неактивны, мало кормятся и плохо набирают вес. Они живут на дне, где прячутся в норках. Вода на дне теплее, это и спасает особей в зимний период. Самцы покидают свое убежище на 2-3 часа, пока самки заботятся о потомстве. Именно в этот момент и можно поймать рака.

Глубина обитания раков составляет 1-3 метра. Эту особенность надо обязательно учитывать при организации ловли.

Приманка для раков

Раки – всеядные пресноводные, потому их рацион довольно разнообразен. Особи предпочитают свежую животную пищу, а при ее отсутствии лакомятся различной водной растительностью. Это люди считают раков падальщиками, потому что понимают, что медлительный рак не может быть эффективным в преследовании быстрой добычи.

© elinkac — depositphotos.com

Особенность и в том, что рацион особей существенно меняется в момент перехода рака от подростковой стадии к взрослой. Именно поэтому молодые раки редко попадаются в ловушки рыбаков.

подбирая приманку нужно помнить, что наживка должна иметь резкий запах. Это объясняется тем, что в холодной воде ее аромат будет распространяться не так быстро как в теплой. В качестве приманки советуют применять свежую рыбу, различные личинки, лягушку, ракушки, падаль.

Особенности ловли раков зимой

Зимой раков ловят с помощью специальной раколовки, зимних удочек и даже руками. Применяя стандартные техники, на льду проделывают несколько отверстий, чем больше, тем лучше.

© Goruppa — depositphotos.com

Самой эффективной считается ловля на раколовку открытого и закрытого типа. Второй вариант более предпочтительный, поскольку рак никак не сможет выбраться из ловушки самостоятельно. В устройство помещают приманку и погружают раколовку на дно, рядом вбивают колышек и проверяют улов каждые 30-60 минут.

Посмотрите следующее виде и вы ознакомитесь со всеми особенностями ловли раков зимой.

Хорошо, если в раколовке окажется самка (зимой это бывает довольно редко). Не нужно торопиться и извлекать особь. Лучше привязать ее к сетке и отправить на дно, самка сможет привлечь много самцов.

Конечно, раколовка не позволяет насладиться процессом ловли, именно поэтому многие рыбаки выбирают для рыбалки зимнюю удочку. Это довольно интересно, поскольку поклевки рака практически незаметны и едва ощутимы. Рыбаки советуют проверять крючок как можно чаще, чтобы не упустить поклевку.

Ловля рыбы зимой на льду привычное занятие для заядлых рыбаков, а ловля раков позволяет существенно разнообразить досуг – именно так говорят рыбаки.

© 4masik — depositphotos.com

Скажите, доводилось ли вам ловить раков зимой? Поделитесь своими знаниями и опытом в комментариях. Не забывайте подписываться на наш канал и делитесь ссылками на публикацию в социальных сетях.

Где ловить раков? Как ловить раков?

  Где обитают раки?

 Прежде чем приступать к ловле раков, следует помнить, что раки обитают в чистых и относительно чистых водоемах, достаточно богатых кислородом. Поэтому, если вода слишком мутная и стоячая, то ловить раков в ней, в большинстве случае ошибка. Встретить раков можно на различной глубине, как на 2-3 метрах, так и по колено. Обычно они роют норы, глубиной не более 1 метра, где проводят большую часть своего времени, предпочитая оставаться в укрытии.

  В какое время суток ловят раков?

  Предпочтение отдается ловле раков ночью, когда они идут кормиться, примерно с 22.00 до 3.00. Бывают места, где раки идут на промысел в ранние утренние часы. По времени года не существует однозначного ответа, так как во многих регионах существуют запреты на их вылов. Но по мнению большинства мясо раков более нежное и жирное ранней осенью, даже с конца августа по октябрь.

Когда можно ловить раков?

  Существует законодательство относительно ловли раков. Есть некоторые регионы, где ловля раков запрещена весь год, например, это Москва и Подмосковье. В противном случае вас будет ожидать штраф согласно действующему региональному законодательству.

Запрещено везде и всегда:

·         Вылов самок рака, вынашивающих икру и личинок.

·         Вылов рака меньше допустимого размера, для большинства регионов 9-10 см. Замер производится длины тела от линии, соединяющей середину глаз до конца хвостовых пластин.

·         Использование более 3 раколовок на одного гражданина, диаметр более 80 см, шаг ячейки менее 22мм.

·         Вылов раков путем ныряния или вброд.

Запреты на ловлю раков по регионам.

Устанавливаются Правилами рыболовства для каждого рыбохозяйственного бассейна и региона соответственно.

Регион

Действие запрета

Минимальный размер

Астраханская область

с 1 апреля по 30 июня

10 см

Брянская область, Владимирская область

с 1 октября по 30 июня

 

Волгоградская область

с 1 января по 14 сентября

 

Цимлянском водохранилище

с 1 января по 15 сентября

 

Вологодская область

В период вынашивания икры, а также при линьке и с 15 июня по 31 июля

9 см

Калининградская область

с 1 октября по 30 июня

 

Кировская область

с 1 октября по 30 июня

 

Кировская область в реке Юг с притоками

с 15 июня по 31 июля

 

Краснодарском край для Черного моря с бассейнами впадающих рек

с 1 января по 31 мая

 

Краснодарском край для водных объектов рыбохозяйственного значения бассейна Азовского моря

с 1 января по 14 июня

 

Курская область

с 1 октября по 30 июня

10 см

Москва и Московская область

Круглогодично, постоянно

 

Новгородская область

с 25 мая по 10 июня, рак широкопалый запрещен к вылову всегда

 

Оренбургская область, в водных объектах рыбохозяйственного значения Светлинского и Ясенского районов

с 5 июня по 15 июля

10 см

Псковская область

от распаления льда по 15 июля

 

Республика Адыгея

с 1 января по 14 июня

 

Республика Калмыкия. Бассейн реки Маныч, Республики Калмыкия и Чограйском

с 1 января по 30 июня

9 см

Республика Марий Эл

с 1 января до 15 июля и с 10 августа до 10 сентября

10 см

Республика Мордовия

Круглогодично, постоянно

 

Ростовская область. Бассейн реки Маныч

с 1 января по 10 июня

 

Ростовская область (исключая бассейн реки Маныч и Цимлянское водохранилище)

с 1 января по 14 июня

9 см

Ростовская область. Цимлянское водохранилище.

с 1 января по 15 сентября

10 см

Ростовская область. Реке Койсуг (от устья до впадения в нее реки Чмутовой).

Круглогодично, постоянно

 

Самарская область

с 1 января по 15 июля и с 10 августа по 10 сентября

10 см

Санкт-Петербург и Ленинградская

От распаления льда по 15 июля. Запрещено вылавливать рака широкопалого

9 см

Саратовская область

с 1 декабря по 14 июля и с 16 августа по 14 сентября

9 см

Смоленская область

с 1 октября по 30 июня

10 см

Ставропольский край

с 1 декабря по 15 августа

9 см

Тамбовская область

с 1 октября по 30 июня

10 см

Как ловить раков?

На что ловить раков? На какую приманку?

Существуют различные варианты приманок для раков, спорные мнения. Поэтому следует указать лишь варианты наиболее распространённых прикормок.

Вариант №1. Используют свежую рыбу, разрезают на кусочки. Можно добавить укроп в сетчатом мешочке, кусок жмыха.

Вариант №2. Берется ломоть ржаного хлеба, обильно натирается чесноком.

Вариант №3. Рыба, мясо, лягушки, кузнечики, испорченные и вонючие. Запах будет больше распространяться, если тушку разрезать вдоль позвоночника и вывернуть. Хотя многие считают данный метод менее эффективным относительно двух выше перечисленных.


Небольшие хитрости: при использовании хлеба с чесноком, чтобы он простоял дольше, можно поместить в капроновый чулок. Или перекрутить хлеб с чесноком на мясорубке и разложить по марлевым мешочкам. Аромат чеснока является очень привлекательным для раков. Если в качестве приманки использовать рыбу, то предпочтение отдается карасю, лещу, плотве, а вот щуку и окуня раки не очень любят. При использовании лягушки в качестве приманки, ее надо почистить от кожи, т.к. она является недоступной для клешней раков.

Также замечено опытными раколовами, что в весенние и летние месяцы раки охотнее реагируют на приманку с чесноком, а в осенние и зимние – на мясную и рыбную приманки.

Как отцепить рака, если он схватил руку?

Можно набрать в пакет воды и опустить туда рака, когда он почувствует воду хвостом попытается удрать, т.к. раки плавают задом наперед. Или с умеренным усилием надавить на клешню рака большим и указательным пальцами с внешней и внутренней стороны. Ни в коем случае не оттягивайте рака, он не расцепит клешню, и вы можете серьезно повредить руку. 

Как ловить раков — Блог рыбака

20 Декабрь 2013       Виктор      Главная страница » Способы ловли      Просмотров:  

Приветствую Вас на своем блоге! Давайте рассмотрим в этой статье как ловить раков. Есть много способов как ловить раков, давайте разберем несколько из них. Итак приступим. Самый популярный способ ловить раков , это мережи. Они постепенно вытесняют остальные способы. Однако существует много методов как ловить раков, которые не менее заманчивые для любителей охоты за раками.
  

Ручной способ ловить раков

 

Ловить раков руками – это самый простой и, самый старый метод охоты. Нужно аккуратно передвигаться в воде, не поднимая мути и волн. Осматривать все подводные укрытия – камни, тину, утопленные деревья. Как только вы увидите рака, нужно сразу же постараться взять его быстрым движением, поскольку рак заметив опасность быстро ретируется. Этот способ охоты на раков мало подходит если вы боитесь укуса клешнями. Я в этих случаях пользуюсь перчатками для ремонта автомобилей. Кусаются но не больно и вытаскиваешь раков за клешни.

Лучше всего удачная охота идет в ночное время, раки в это время выходят из убежищ для питания и их можно брать руками освещая дно фонарем. Раньше разводили огни для привлечения раков. Это поможет поймать их больше. Поймать руками рака можно на не больших глубинах, не более 2 метров, но с ластами и маской можно и немного глубже. Если ловить раков на более глубоких местах, то нужно применять специальные клещи, но для этого нужно, чтобы вода была прозрачной.

Клещи делаются из дерева, желательно полыми, длиной от одного до трех метров, ими хорошо поднимать раков из воды. В целях безопасности ловить раков нужно вдвоем, чтобы на берегу за вами наблюдали. Есть еще одно приспособление – берут длинную палку и на одном конце делают расщеп, который расширяют с помощью небольшого камня или палочки. С помощью этого приспособления рака не вытаскивают, а только прижимают ко дну и потом свободно берут руками. Этот способ требует тренировки, раки очень подозрительны и часто прячутся в укрытиях. Но эти методы хороши только в ясной воде, когда раков можно хорошо разглядеть.

  

Как ловить раков с помощью приманок

 

В выше описанных методах описано как ловить раков без приманок. Без них улов практически случайный по улову, а так же требует постоянного присутствия охотника – раколова. При применении приманок ужение раков получается более уловистей. Они приманивают рака к ловушкам и постоянно их держат возле себя. Окруживших ловушку раков можно собирать руками.

Есть еще один эффективный метод как ловить раков, это ужение – когда рак хватает наживку клешнями, и тогда его можно брать руками или сачком и вытаскивать из воды. Только есть одно слабое место – рак может в любой момент отцепиться и уйти восвояси. Для этого к длиной палке в 1-2 м. нужно привязать леску, а к ней привязывают наживку.

Острый конец этой удочки нужно воткнуть в дно водоема недалеко от берега. Наживку кладут в стороне для привлечения раков. Желательно ставить побольше таких приманок, чем больше тем лучше. Чем больше раков, тем больше удочек нужно ставить. Такая приманка привлекает раков с площади не менее 10 квадратных метров. Поэтому такие удочки нужно ставить не ближе 5 метров друг от друга, это более эффективно. И занимать площадь не более 100 метров по длине.

Во время всей ловли раков, нужно проверять удочки не реже 3 раз в час. Когда улов становится меньше, надо переменить место ловли. Проверяют удочку аккуратно, не спеша поднимая наживку, чтобы раки не соскочили и берут их снизу. Если палка слегка покачивается, значит рак уже на приманке и пора его вытаскивать. Далее рассмотрим закидушку и жерлицу – чем то похожие на предыдущую снасти.

Только в здесь уже используют леску длиной 1 – 2 метра к которой привязывают наживку, на другом конце лески нужно привязать поплавок. К жерлице возле приманки нужно привязать груз. Еще можно использовать простую палку, которую втыкают в дно, а перед этим на острый конец палки надевают наживку, так, чтобы она свободно лежала на дне когда палка будет воткнута в дно водоема. Во всех рассмотренных способах ловли одинаковая техника ловли. Так как нужно все время держать в руках удилища, чтобы сразу реагировать на схватившего приманку рака.

  

Сачки для ловли раков, или рачевни

 

Рачевни изготавливают цилиндрическими из сетки, которые надеты на металлическое кольцо. Кольца сейчас делают из проволоки. В диаметре кольцо примерно 50 см, к нему нужно прикрепить несколько веревок одинаковой длины, чтобы наша рачевня не перекашивалась. Соединяют между собой и к ним привязывают шнур для опускания и поднятия ловушки.

Наживку нужно привязать к сетке или к натянутому по диаметру обруча шнуру, и ловушку опускают на дно. Веревку от рачевни нужно привязать на берегу или к палке воткнутой в дно не далеко от берега. При ловле рачевней раки схватившие приманку не могут сами убежать из нее. При подъеме рачевни не следует медлить. Сразу желательно ставить несколько таких ловушек на расстоянии не более 10 метров друг от друга.

Рачевняс двумя обручами является более эффективной, в ней обручи находятся друг от друга на расстоянии 10 см. На дне эти обручи складываются, а при доставании растягиваются и не дают раку покинуть ловушку. Еще можно пользоваться большими сачками. Снизу у такой ловушки находится или палка или прут, к которому прикреплена ручка. К ним крепится сетка в металлическом корпусе. Такой сачок нужно перемещать по дну, которое должно быть относительно ровным, чтобы не повредить сачок.

  

Как ловить раков мережами

 

Мережи для ловли раков это такие ловушки для ловли раков, появились в 19 веке, они имеют преимущество по сравнению с другими ловушками, которые мы рассмотрели выше. Основное их преимущество в том, что они не нуждаются в постоянной проверке, потому, что раки попавшие туда сами выбраться уже не могут. Это дает возможность ставить сразу несколько мережей и не контролировать их постоянно.

Минус в ловле мережами, что это менее увлекательная чем ныряние за раками или использование клещей. любителей . Существует несколько разновидностей мережей. Мережи для раков , это простой вариант мережи для ловли рыб. По конструкции горловины мережи бывают двух видов: – стоячие мережи, с верхним расположением горловины; – лежащие мережи, с боковым расположением горловин;

  

Рассмотрим стоячие мережи

 

Общее у стоячих мережейэто одна горловина и форма конуса, пирамиды или полусферы.Мережи нужно опускать на дно в вертикально, чтобы горловина была сверху. Дно у мережи должна быть круглой или треугольной. Сейчас в основном используется полусферическая мережа с круглым дном. Каркас для стоячей мережи делается из проволоки, которая соединяет горловину и нижний обруч.

Раньше корпус для мережей изготавливался из деревянных прутьев, сейчас изготавливается полностью из проволоки. Внутри горловины нужно привязать круглый воротничок в диаметре не более 10 см. он должен быть скользким, чтобы рак по нему падал в мережу и назад не мог выбраться. Если сделать горловину съемной, то раки будут легко выниматься из нее.

Диаметр воротничка нужно сделать чуть меньше самой горловины. Мережу переворачивают и раки высыпаются из нее свободно. Мережи лучше делать разборными, тогда их лучше перевозить в большом количестве. Сейчас используются сетки из капроновых нитей, они прочные и хорошо складываются. Их нельзя кипятить, достаточно промывать после каждой охоты на раков.

Ячея сетки нужно ставить как на живца, не более 20 мм. Наживку нужно привязать леской к сетке, чтобы она была посередине или на дно мережи. Или придумать другой метод крепления, но главное, чтобы приманка не была с краю у сетки, так как раки должны лакомиться ею внутри ловушки, а не снаружи. И рак не мог ее вытащить и оставить вас без улова.

 Рассмотрим лежачие мережи

Лежачие мережи для ловли раков – вытянутые в длину, имеют одну или две горловины. Их нужно опускать на дно горизонтально, так чтобы горловины были параллельно относительно дна. Они имеют форму треугольную, прямоугольную, цилиндрическую.

Цилиндрические мережи – полностью изготавливаются из сетки. Горловины делаются диаметром примерно 10 см. и находятся по бокам. Между собой горловины связаны веревками, чтобы быть натянутыми и рак мог свободно в них заползти и в тоже время шнурки мешают ракам убежать из ловушки. Длина ловушки не более 50 см, с диаметром 20 см.

Деревянные (из прутьев) мережи меньше пугают раков, чем мережи из проволоки и сетки. В них раки свободно заходят, не чувствуя опасности. Но складные мережи берут первенство из за своей мобильности. Они делаются из проволоки в виде спирали или кольцами. Они расправляются и ложатся на дно в вытянутом состоянии, закрепив по краям кольца на растяжку.

Пружинная мережа открывается просто, надо лишь отпустить стопор и она вытянется. Треугольные мережи делаются из треугольников соединенных между собой сеткой. Размеры такие же: длина 50 см, ширина 20 см. В них также расположены горловины – по краям мережи (с торцов). Опускают ее в воду на одну из граней. Минус в таких мережах то, что они не складываются и много их с собой не возьмешь.

Полуцилиндрические мережи делают из нескольких так называемых полу обручей. Которые соединяются между собой рейками. Сверху все обтягивается сеткой. В таких мережах одна или две горловины. Размеры такие же: длина 50 см. ширина 20 см. В лежачих мережах наживку нужно крепить так. чтоб она висела посередине или была привязана по середине на дно ловушки. Из таких ловушек ракам трудно выбраться, но попадая в западню они начинают искать выход.

Поэтому нужно периодически, раза три за ночь проверять ловушки и собирать добычу. На какую мережу лучше ловить? Все зависит от места лова, дна водоема. И качества сделанных мереж. Конечно деревянные меньше пугают раков, но проволочные надежнее. Лучше если есть две горловины. Воротники должны быть скользкими. И если ставить много мережей, то желательно соединить их одной веревкой для удобства поиска и проверки раков.

Давайте рассмотрим приманки для раков

Приманке нужно уделить особое внимание. Она должна быть с сильным запахом. Раки предпочитают свежую мирную рыбу – плотву, леща, карасей. Рыбу нужно или поджарить или подержать на солнце, чтобы пошел запах. Также можно использовать прокисшее молоко, завернутое в марлю.

  

Как же и где нужно ловить раков?

 

Уловы раков зависят от некоторых условий. Главное условие – это вода. Если она темная, через нее плохо проходит свет. В ней раки раньше начинают охотиться и ловушки можно ставить днем, активность раков будет до позднего вечера, ночью она уменьшается. Если вода в водоеме светлая вода – ловушки нужно ставить позже. с наступлением темноты. Активность раков идет всю ночь.

К утру активность уменьшается, но поймать раков еще можно. В темной воде ловушки ставят на меньшую глубину чем в светлой воде. Я ныряя ловил раков руками даже днем и до наступления темноты. Еще одно условие – это погода. Если погода пасмурная, то ловить раков можно начинать раньше. В ясную нужно подождать пока солнце не начнет садиться. Рак менее активен в полнолуние и когда прохладно, также в грозу.

Ловушки можно ставить на разных глубинах, от 1 метра до нескольких метров. Собирать раков нужно в железную посуду, они ее не прокусят и не убегут. При нырянии я собирал раков железный садок. К нему на длинной веревке привязывал поплавок из пластиковой бутылки. Это помогало всегда знать где садок под водой.

Мы рассмотрели как ловить раков. Какие мережи и прикормки использовать. Надеюсь это хоть немного, но поможет вам. Удачной вам ловли раков!

 

 

 

На главную страницу.

Почитайте еще интересные статьи

    Метки: Ловля раков     

Целевое секвенирование нового поколения ракового транскриптома улучшает обнаружение вариантов последовательности и новых слитых транскриптов

Genome Biol. 2009 г.; 10(10): 115 р.

, 1 , 2 , 1 , 1 , 1 , 3 , 1 , 2, 4 и 1

Джошуа Z Левин

1 Программа секвенирования и анализа генома, Институт Броуда Массачусетского технологического института и Гарварда, 320 Charles Street, Cambridge, MA 02141, USA

Michael F Berger

2 Программа рака, Институт Броуда Массачусетского технологического института и Гарварда, 5 Кембриджский центр, Кембридж , MA 02142, США

Xian Adiconis

1 Программа секвенирования и анализа генома, Институт Броуда Массачусетского технологического института и Гарварда, 320 Charles Street, Кембридж, Массачусетс 02141, США

Питер Рогов

и анализ генома Program, Broad Institute of MIT and Harvard, 320 Charles Street, Cambridge, MA 02141, USA

Alexandre Melnikov

1 Программа секвенирования и анализа генома, Broad Institute of MIT and Harvard, 320 Charles Street, Cambridge, MA 02141, USA

Timothy Fennell

3 Sequencing Platform, Broad Institute of MIT and Harvard, 320 Charles Street, Cambridge, MA 02141, USA

Chad Nusbaum

100004 1

Программа анализа, Широкий институт Массачусетского технологического института и Гарварда, 320 Charles Street, Cambridge, MA 02141, USA

Levi A Garraway

2 Cancer Program, Broad Institute of MIT and Harvard, 5 Cambridge Center, Cambridge, MA 02142, USA

4 Отделение медицинской онкологии и Центр исследования генома рака, Онкологический институт Дана-Фарбер, Гарвардская медицинская школа, 44 Binney Street, Boston, MA 02115, USA

Andreas Gnirke

1 Программа секвенирования и анализа генома , Институт Броуда Массачусетского технологического института и Гарварда, 320 Charles Street, Cambridge, MA 02141, USA

1 Программа секвенирования и анализа генома, Институт Броуда Массачусетского технологического института и Harva rd, 320 Charles Street, Cambridge, MA 02141, USA

2 Cancer Program, Broad Institute of MIT and Harvard, 5 Cambridge Center, Cambridge, MA 02142, USA

3 Sequencing Platform, Broad Institute of MIT and Гарвард, 320 Charles Street, Cambridge, MA 02141, США

4 Отделение медицинской онкологии и Центр исследования генома рака, Онкологический институт Дана-Фарбер, Гарвардская медицинская школа, 44 Binney Street, Бостон, MA 02115, США

Автор, ответственный за переписку.

Поступила в редакцию 20 августа 2009 г .; Пересмотрено 23 сентября 2009 г .; Принято 16 октября 2009 г.

Copyright © 2009 Levin; лицензиат BioMed Central Ltd. Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/by/2.0), которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом предоставленном носителе. оригинальная работа правильно цитируется. Эта статья цитировалась другими статьями в PMC.
Дополнительные материалы

Дополнительный файл данных 1 Имена генов приманки и номера вступления в транскрипт

GUID: B4092A7F-78D8-4173-92C0-5B61215E3101

Дополнительный файл данных 2 Новые SNPS

153B53B5B53B5B53B5B53B5B53B5B53B5B53B5B53B5B53B5B53B5B53B5B53B5B53B53B53B53B53B53B53B53B53B53B53B53B53B5. -0C36D4332C4E

Дополнительный файл данных 3 соединения сплайсинга

GUID: 3A95D378-2DA3-47B2-B89A-D496E78D6BE3

ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЙ Файл данных 4 Читает от транскриптов Fusion

Guid: 9C7996666D-046666D-0467666D-04676666D-04676666d-404676666D-0466666666666666666666 гг. файл данных 5 Bait sequences

GUID: 1AF6F983-403B-48E7-9FE9-4D7895E

Abstract

Targeted RNA-Seq сочетает в себе секвенирование следующего поколения с захватом последовательностей из соответствующего подмножества транскриптома.При тестировании путем захвата последовательностей из библиотеки кДНК опухоли путем гибридизации с олигонуклеотидными зондами, специфичными для 467 генов, связанных с раком, этот метод показал высокую селективность, улучшенное обнаружение мутаций, позволяющее обнаруживать новые химерные транскрипты, и предоставил данные об экспрессии РНК. Таким образом, таргетная РНК-Seq дает расширенное представление о молекулярном состоянии набора генов «высокого интереса».

История вопроса

В последние годы технологическая революция переместила секвенирование ДНК с традиционных методов Сэнгера на секвенирование «следующего поколения» (см. обзор [1]).Применение этих новых методов секвенирования к библиотекам кДНК, называемых RNA-Seq, позволяет получить огромное количество информации, помимо той, что получена при секвенировании геномной ДНК (см. обзор [2]). RNA-Seq обеспечивает понимание транскрипции генома на нескольких уровнях, поскольку он дает информацию о последовательности, сплайсинге и уровне экспрессии, что приводит к идентификации новых транскриптов [3,4] и изменений последовательности. Для исследования соматических мутаций при раке (например, Атлас генома рака [5-7]) этот метод имеет то преимущество, что позволяет выявить изменения в кодирующих последовательностях, которые с большей вероятностью влияют на функцию, по сравнению с секвенированием геномной ДНК.Хромосомные перестройки, включая транслокации, представляют собой важный класс мутаций при раке [8]. Хотя хромосомные перестройки могут быть обнаружены с помощью секвенирования геномной ДНК следующего поколения [9,10], RNA-Seq является мощным инструментом для выявления тех перестроек, которые приводят к химерным транскриптам и с большей вероятностью будут иметь функциональные последствия при раке [3,11]. ].

Несмотря на эти преимущества RNA-Seq, сложность транскриптома и широкий динамический диапазон уровней экспрессии делают секвенирование всего транскриптома дорогостоящим мероприятием, особенно на той глубине, которая необходима для выявления мутаций и выявления структурных перестроек или аберрантных форм сплайсинга при низком уровне экспрессии. — обилие мРНК.Mortazavi и коллеги [12] сообщили, что для обеспечения однократного охвата транскриптома требуется 40 миллионов прочтений, в то время как для вызывающих генотипов с высокой достоверностью может потребоваться уровень охвата по меньшей мере от пятикратного до 20-кратного [13]. Такой масштаб охвата неизменно приводит к чрезмерной выборке большого количества транскриптов, что отрицательно сказывается на эффективности и общей силе подхода.

Соображения стоимости и эффективности привели к появлению методов, позволяющих проводить «целевое» секвенирование следующего поколения.Были разработаны два подходящих высокопроизводительных подхода для обогащения специфических последовательностей геномной ДНК: мультиплексированные молекулярные инверсионные зонды (MIP) [14-16] и захват путем гибридизации с олигонуклеотидными зондами на микрочипах [17-19] или в растворе [20]. MIP подобны праймерам для ПЦР в том, что они обогащают локусы, определяемые двумя фланкирующими специфическими последовательностями. Таким образом, они не подходят для открытия новых хромосомных перестроек, таких как транслокации. В отличие от этого захват с помощью гибридизации может обогатить фрагменты ДНК, выходящие за пределы последовательности зонда, включая последовательности, которые не являются смежными в эталонной последовательности.Гибридная селекция в растворе — это метод захвата, в котором используется сложная смесь РНК-приманок, полученных из олигодезоксинуклеотидов, амплифицированных с помощью ПЦР, для отбора гибридизующихся последовательностей в библиотеке фрагментов ДНК [20]. Однако на сегодняшний день подходы захвата на основе гибридизации применялись в основном к геномной ДНК, как правило, с целью обогащения представляющей интерес экзонной ДНК. Хотя целевое секвенирование геномной ДНК облегчает обнаружение/профилирование мутаций, оно не может исследовать множество дополнительных геномных изменений, влияющих на ДНК и мРНК, которые имеют решающее значение для биологии опухоли и разработки терапевтических средств.

В этом исследовании мы изучаем осуществимость и эффективность «таргетной РНК-Seq», применения методов гибридизационного захвата к анализу транскриптома. Применительно к 467 генам, связанным с раком, этот новый подход увеличил охват малочисленных транскриптов до уровней, которые позволили надежно идентифицировать изменения последовательности. Кроме того, этот метод предоставил информацию об относительных уровнях экспрессии, облегчил открытие новых вариантов сплайсинга и позволил обнаружить новые слитые транскрипты и их изоформы, которые в противном случае не были бы обнаружены.Таким образом, этот метод занимает важную нишу в исследованиях рака, а также в других областях геномики, генерируя всю многогранную информацию о геноме и экспрессии генов в одном прямом эксперименте.

Результаты

Отбор гибридов кДНК

Для разработки целевого метода RNA-Seq мы создали сложный пул биотинилированных олигонуклеотидных зондов (приманок) для транскриптов, связанных с раком, и использовали их для захвата кДНК из библиотеки, подготовленной для секвенирования компанией Illumina.Всего мы нацелились на 467 генов (887 различных транскриптов; таблица S1 в файле дополнительных данных 1), представляющих большинство всех генов протеинтирозинкиназ, генов ядерных гормональных рецепторов и генов, каталогизированных в переписи генов рака [21]. Приманки были разработаны в виде мозаики с минимальным перекрытием, чтобы охватить всю кодирующую белок область каждого транскрипта. Чтобы проверить метод, библиотека кДНК для секвенирования Illumina была сконструирована из клеточной линии хронического миелоидного лейкоза (CML) K-562. Из аликвоты этой библиотеки мы выбрали кДНК, гибридизующиеся с этими приманками кДНК рака.Мы использовали ПЦР для регенерации библиотеки двухцепочечной ДНК, которая была секвенирована на одной дорожке на платформе Illumina Genome Analyzer. Чтобы получить базовый уровень для сравнения, мы также секвенировали исходную библиотеку необогащенной кДНК.

Обогащение последовательностей

Анализ последовательности библиотеки кДНК после отбора гибридов показывает, что почти все высококачественные выравнивающие считывания происходят из целевых генов. Приблизительно восемь миллионов прочтений 76-мерной последовательности с фильтром чистоты [13] были созданы для каждой библиотеки кДНК (до и после отбора гибридов; таблица).Чтения были согласованы со всеми курируемыми транскриптами RefSeq, что требовало уникального геномного локуса происхождения для каждого размещения (см. Материалы и методы). Гибридный отбор привел к значительному увеличению специфичности: 98% выровненных прочтений сопоставляются с целевым транскриптом по сравнению с 5% до гибридного отбора (таблица). Как и ожидалось, общее улучшение среднего охвата последовательностей целевых транскриптов было наибольшим для областей, кодирующих белок, увеличившись с 14,4× до гибридной селекции до 606,3× после гибридной селекции — разница в 42 раза (рис. ).Распределение охвата последовательностей для 467 генов-мишеней показано на рисунке. Например, только 62 (13%) гена достигают 20-кратного охвата последовательностей до гибридной селекции, тогда как дополнительные 234 гена из общего числа 296 (63%) генов покрываются как минимум 20-кратным после гибридной селекции. Также следует отметить, что количество генов, обнаруживаемых хотя бы в одном прочтении, увеличивается с 360 до 410 (с 77% до 88%). Остальные 12% генов, вероятно, экспрессируются на очень низком уровне или вообще не экспрессируются у К-562.

Увеличение охвата последовательности. (a) Среднее покрытие последовательностей по регионам. Участки транскриптов (5′-UTR, CDS, 3′-UTR) были разделены на децили, и покрытие последовательностей для каждого дециля усреднялось по всем 887 транскриптам-мишеням. Покрытие отображается до гибридного отбора (синий) и после гибридного отбора (красный). Средняя длина каждого региона составляет 292, 2136 и 1729 соответственно. (b) Распределение охвата последовательностей целевых генов. Для каждого порога покрытия последовательностей (ось X) на график нанесена доля 467 генов, находящихся на этом пороге или выше (ось Y) до гибридного отбора (синий) и после гибридного отбора (красный).

Таблица 1

Анализ последовательности Illumina в селекции гибридного кДНК

Критерии Последовательность фильтр Перед После
Общая чистота фильтрованного считывает 7

4

7635761
выравнивания всем транскриптом 4515009 6664152
Уникальных в транскриптоме Mapping 4303769 6508099
к 1 из 887 мишеней транскриптов 220151 6364131
на -целевая специфичность 5% 98%

Это увеличение охвата последовательностей также повысило чувствительность обнаружения вариантов последовательностей в этих генах-мишенях.В положениях с достаточным охватом последовательностей мы идентифицировали нереференсные основания, включая SNP и мутации-кандидаты. Гибридная селекция позволила нам идентифицировать 257 известных SNP с высокой достоверностью (LOD > 5) в кодирующих последовательностях генов-мишеней по сравнению с 76 до гибридной селекции. Точно так же мы определили четыре новых варианта до гибридного отбора и еще 12, всего 16 после гибридного отбора (таблица S2 в файле дополнительных данных 2). Тринадцать (81%) из 16 были успешно подтверждены традиционным секвенированием по Сэнгеру продуктов ПЦР, амплифицированных из геномной ДНК K-562.Для сравнения, три (75%) из четырех новых вариантов, обнаруженных до отбора гибридов, были подтверждены.

Затем мы спросили, зависит ли степень обогащения гена-мишени от распространенности его транскриптов до отбора гибридов. Как показано на рисунке, охват последовательностей, наблюдаемый после отбора гибридов, хорошо коррелирует с охватом последовательностей, наблюдаемым до отбора гибридов, что указывает на то, что относительное количество кДНК из генов-мишеней в целом сохранялось. Этот результат предполагает, что некоторые результаты профилирования экспрессии могут быть получены одновременно с информацией о вариантах последовательностей для генов, на которые направлена ​​гибридная селекция.Корреляция ( r 2 = 0,71) несколько ниже, чем обычно наблюдается между техническими повторами эксперимента RNA-Seq [12], но сравнима с корреляцией между различными методами профилирования экспрессии (например, RNA-Seq и microarray). гибридизация) [22]. Эта корреляция улучшается, если анализ ограничивается транскриптами в более узком диапазоне содержания GC: r 2 = 0,78 для GC от 0,4 до 0,6 (645 транскриптов) и r 2 = 0.87 для GC от 0,45 до 0,55 (317 транскриптов), что указывает на некоторую погрешность, вызванную отбором гибридов или дополнительным раундом ПЦР, или тем и другим.

Сохранение уровней экспрессии транскриптов-мишеней при гибридной селекции. Для каждого транскрипта-мишени строится покрытие последовательностью кодирующей области до и после гибридного отбора.

Общее увеличение охвата последовательностей целевых транскриптов также позволило идентифицировать большее количество изоформ альтернативного сплайсинга этих генов.Принимая во внимание все возможные логические внутригенные комбинации экзонов, аннотированные в RefSeq, для 467 генов-мишеней существует 70 344 гипотетических соединения сплайсинга, и 6 593 из них были аннотированы в RefSeq. Количество подтвержденных соединений экзонов с участием генов-мишеней увеличилось с 2958 до гибридной селекции до 4720 после гибридной селекции (таблица S3 в файле дополнительных данных 3). Из этих подтвержденных соединений 294 ранее не были аннотированы в RefSeq, включая 130 генов-мишеней. Гены, демонстрирующие альтернативный сплайсинг в К-562, идентифицировали, как описано в разделе «Материалы и методы».Гибридная селекция выявила по крайней мере 177 генов-мишеней, подвергшихся альтернативному сплайсингу, по сравнению с 52 генами-мишенями до гибридной селекции. В совокупности эти результаты демонстрируют способность целевой RNA-Seq эффективно освещать как SNP, так и варианты сплайсинга.

Обнаружение слитых транскриптов

Поскольку хромосомные перестройки играют важную роль в развитии рака [8], мы стремились определить, может ли отбор гибридов кДНК предоставить дополнительные доказательства для этого класса мутаций.Хотя К-562 был предметом многочисленных исследований, до недавнего времени на нуклеотидном уровне была идентифицирована только транслокация BCR-ABL1 , которая экстенсивно амплифицируется [23]. Мы провели поиск данных кДНК Illumina на наличие признаков слияния генов или слитых транскриптов, состоящих из частей двух разных генов (см. Материалы и методы). Короче говоря, мы выдвинули кандидатов на слияние из 76-мерных прочтений, для которых первые 30 оснований и последние 30 оснований однозначно выровнены с отдельными генами, а затем мы снова провели поиск всех прочтений на предмет 76-меров, которые полностью соответствовали слиянию между этими генами. два гена (требующие перекрытия по крайней мере 12 оснований с каждым геном).Мы обнаружили два слияния генов в библиотеке кДНК до отбора гибридов: BCR-ABL1 (13 прочтений) и NUP214-XKR3 (9 прочтений). Оба слияния генов были обнаружены с одинаковой частотой у K-562 в недавно опубликованном исследовании RNA-Seq [11]. После гибридного отбора BCR-ABL1 участвовал в 874 чтениях, а NUP214-XKR3 участвовал в 152 чтениях (таблица и рисунок). Хотя слияния NUP214 ранее наблюдались в опухолях и других клеточных линиях [11, 24, 25], NUP214-XKR3 представляет особый интерес, поскольку показывает, что мы можем обогатить транскрипты слияния, для которых только один из генов, NUP214 , стал мишенью для приманок гибридного отбора.Прочтения NUP214-XKR3 происходят от одного конца более крупного фрагмента, и ориентация прочтений указывает на то, что фрагменты кДНК состоят в основном из последовательности NUP214- (таблица S4 в файле дополнительных данных 4). Это смещение в составе последовательности фрагментов кДНК слитого транскрипта, как и ожидалось, поскольку приманки нацелены только на последовательность NUP214 . Еще одним важным открытием является то, что этот метод позволил обнаружить три дополнительные изоформы слитого транскрипта NUP214-XKR3 в 7.6 миллионов прочтений (рисунок и таблица), которые не были обнаружены без отбора гибридов, а также в 20,7 миллионах прочтений в недавнем исследовании K-562 RNA-Seq [11]. Все четыре транскрипта слияния NUP214-XKR3 были подтверждены с помощью секвенирования продуктов ОТ-ПЦР по Сэнгеру (данные не показаны). Интересно отметить, что только одно из четырех слияний NUP214-XKR3 поддерживает открытую рамку считывания после события слияния (рис. ). Это слияние не было обнаружено ни при секвенировании библиотеки кДНК перед отбором гибридов, ни в недавнем исследовании K-562 RNA-Seq [11].Понимание функциональной значимости этих транскриптов слияния выходит за рамки данного исследования, но эта работа ясно демонстрирует способность направленной РНК-Seq обнаруживать их.

Последовательности транскриптов слияния NUP214-XKR3, обнаруженные после гибридной селекции. После гибридного отбора 152 чтения были выровнены с транскриптомом и обнаружены как слияния NUP214-XKR3 . Сверху вниз мы наблюдали 137, четыре, восемь и три прочтения этих транскриптов. От NUP214 (экзон 27) до XKR3 (экзон 4) ниже расположен стоп-кодон (не показан).Только от NUP214 (экзон 29) до XKR3 (экзон 4) сохраняется открытая рамка считывания после слияния. Перед гибридным отбором восемь прочтений были выровнены с транскриптомом и обнаружены как слияния NUP214-XKR3 ; был обнаружен только транскрипт от NUP214 (экзон 29) до XKR3 (экзон 2). Последовательность из ДНК NUP214 показана строчными буквами, а из XKR3 — жирным шрифтом и прописными буквами.

Таблица 2

Обнаружение слитых транскриптов с усилением гибридной селекции

5′ Gene 5′ Chr . 3′ Ген 3′ Хр . До После
BCR 22 ABL1 9 13 874
Nup214 б 9 XKR3 б, 22 9 152
SNHG3-RCC1 б, 1 PICALM б 11 1 39
PRIM1 , г 12 NACA б, г 12 0 22
NCKIPSD д 3 CELSR3 c, d 3 0 5

5 SLC292A1 90, d 5
6 HSP90AB1 д 6 0 2

В дополнение к BCR-ABL1 и Nup214-XKR3 , обе из которых были обнаружены до гибридного выбора, мы идентифицировали четыре слияния генов после гибридной селекции, которые в противном случае могли остаться незамеченными и не были обнаружены ранее [11].В каждом случае только один из двух генов был специфически нацелен на приманки (таблица и таблица S4 в файле дополнительных данных 4). Три из четырех слияний генов связаны с продуцированием «считываемых» транскриптов, в которых экзоны из отдельных смежных генов объединяются в одну молекулу мРНК. Прочитанные транскрипты ранее были обнаружены при раке, и было показано, что они способствуют онкогенности [3]. Четвертое новое слияние генов включает ранее аннотированный сквозной транскрипт SNHG3-RCC1 на хромосоме 1 и PICALM на хромосоме 11.Как и в случае с NUP214-XKR3 , для SNHG3-RCC1 PICALM были обнаружены множественные изоформы сплайсинга, и четыре из пяти из них были подтверждены секвенированием продуктов ОТ-ПЦР (данные не показаны). Хотя эти наблюдения согласуются с одиночной геномной транслокацией, за которой следует альтернативный сплайсинг полученной РНК в обоих случаях, также возможно, что дальнейшие амплификации и перестройки в этом локусе вносят свой вклад в наблюдаемые множественные транскрипты слияния.

Обсуждение

В этом исследовании мы продемонстрировали, что сочетание гибридизационного захвата библиотеки кДНК с секвенированием Illumina обеспечивает надежный и чувствительный метод для обнаружения широкого спектра изменений последовательностей ДНК и РНК, присутствующих в раковых клетках.Во-первых, этот метод имеет очень высокую специфичность, так как 98% последовательности, картируемой в RefSeq, выравниваются с целевыми транскриптами после гибридной селекции (таблица). Во-вторых, эта селективность приводит к улучшенному обнаружению SNP (рис. 1), изоформ сплайсинга и транскриптов слияния (таблица) в транскриптах-мишенях. Важно отметить, что это свойство снижает объем секвенирования и, следовательно, затраты, необходимые для выявления мутаций и других вариантов, связанных с раком. В-третьих, различия в обилии транскриптов обычно сохраняются после отбора гибридов (рис. 1), вероятно, потому, что приманки находятся в молярном избытке во время гибридизации [20].Точно так же сохранение изменений числа копий генома (то есть амплификации и делеции) наблюдалось после гибридной селекции геномной ДНК в клеточных линиях с хорошо охарактеризованными хромосомными аберрациями (M.F.B. и L.A.G., неопубликованные данные) и в экспериментах по гибридизации на основе фильтров. [26]. В-четвертых, информация, отражающая функцию, такую ​​как уровни экспрессии, альтернативный сплайсинг и редактирование РНК, может быть получена с помощью RNA-Seq непосредственно из входного материала РНК, а не из геномной ДНК.Помимо уровней экспрессии РНК (рис. ), также можно продемонстрировать, что конкретный слитый транскрипт экспрессируется, идентифицировать слитые транскрипты с генами-партнерами, которые не находятся в целевых приманках, и даже показать относительное количество различных сплайсированных слитых транскриптов (таблица). и рисунок). В-пятых, слитые транскрипты в результате транс-сплайсинга [27] также будут обнаружены этим методом, но не с помощью геномного секвенирования, и их можно будет отличить от транслокаций с помощью проверочных экспериментов с геномной ДНК.Таким образом, путем секвенирования кДНК, а не геномной ДНК, мы получили более полное представление о биологическом состоянии этой клеточной линии. Недавние исследования, в которых использовались MIP для выбора последовательностей, подлежащих редактированию РНК [28] или для анализа аллель-специфической экспрессии [29], дают дополнительные примеры того, как целевая RNA-Seq может улучшить наше понимание молекулярного состояния транскриптома. Наконец, этот метод легко масштабируется для большего количества образцов и генов.

Наш целевой метод RNA-Seq обеспечивает прямой и мощный подход к обнаружению и характеристике транслокаций и изучению их распространенности при всех типах рака [8], включая солидные опухоли, которые являются областью активных исследований [3,4].Хотя роль транслокаций при лейкозах и саркомах хорошо известна, нам удалось идентифицировать новые транскрипты слияния в хорошо изученной клеточной линии K-562 CML (таблица). Обогащая последовательностями кДНК из генов, имеющих известное отношение к раку, таргетная РНК-Seq делает возможной идентификацию транслокаций для любого количества целевых генов в одном эксперименте. Кроме того, онкогены часто имеют несколько партнеров по транслокации [8], и этот метод является эффективным инструментом для выявления новых партнеров для генов, ранее идентифицированных в транслокациях, поскольку в приманках гибридной селекции должен присутствовать только один из двух транслоцированных генов.Этот метод способен восстанавливать транскрипты слияния, в которых существуют неполные совпадения с приманками, вероятно, потому, что приманки, соседние с приманкой, последовательность которых содержит точку разрыва, позволяют это восстановление и обогащение. Это может быть возможно, потому что вставки библиотеки кДНК имеют размер от 290 до 390 п.н., что больше, чем приманки из 170 оснований.

Интересно сравнить эффективность целевой RNA-Seq для улучшения обнаружения малочисленных транскриптов с эффективностью нормализации библиотеки кДНК. Нормализация лучше подходит для обнаружения изменений последовательности в транскриптах, которые, как известно, не связаны с конкретным биологическим вопросом.Напротив, целевая RNA-Seq идеально подходит для увеличения охвата подмножества транскриптов «высокого интереса». Кроме того, в отличие от нормализации, таргетная RNA-Seq сохраняет информацию об уровне экспрессии (рис. 1). Кроме того, целевая RNA-Seq может обеспечить более высокое увеличение охвата подмножества целевых транскриптов в зависимости от количества разработанных уникальных приманок. Если охват транскриптов с более низкой численностью является приоритетом в данном эксперименте, информация об обилии транскриптов может использоваться во время разработки приманки, чтобы сосредоточиться на тех транскриптах с целевой РНК-Seq.Обычные методы нормализации [30, 31] вряд ли позволят легко достичь примерно 30-кратного обогащения для большинства малочисленных транскриптов, наблюдаемых в наших целевых экспериментах RNA-Seq (рис. ; JZL., XA, неопубликованные результаты).

Выводы

Благодаря сочетанию гибридизационного захвата кДНК и секвенирования следующего поколения таргетная РНК-Seq обеспечивает эффективное и экономичное средство для одновременного анализа определенного подмножества транскриптома на наличие мутаций, структурных изменений и уровней экспрессии.Этот метод преодолевает ограничения обычного RNA-Seq, который требует значительно большей глубины секвенирования для создания достаточного охвата малочисленных транскриптов. Он также обходит определенные ограничения целевого секвенирования геномной ДНК, при котором обнаружение хромосомных перестроек может быть затруднительным (и анализ эффектов мРНК невозможен). В одном эксперименте таргетная РНК-Seq дает множество качественной и количественной информации, которую невозможно получить ни одним другим методом.Таким образом, Targeted RNA-Seq является мощным и удобным новым подходом, который хорошо подходит для широкого спектра крупномасштабных исследований по профилированию опухолей во многих клинических или исследовательских условиях.

Материалы и методы

Создание и секвенирование библиотеки Illumina

Библиотека кДНК K-562 (размер вставки от 290 до 390 пар оснований) для секвенирования Illumina была сконструирована из аликвоты 500 нг двухцепочечной кДНК, приготовленной из 3 мкг полиА + РНК (Амбион, Остин, Техас, США), праймированная 0.3 мкг случайных гексамеров (Invitrogen, Карлсбад, Калифорния, США), как описано ранее [22], за исключением того, что (а) не использовался ингибитор РНКазы, (б) низкоинтенсивное сдвига выполнялось в течение 5 секунд, а не 4 секунд, и (с ) Праймеры для ПЦР удаляли 1,8-кратным объемом гранул AMPure (Agencourt Bioscience Corporation, Беверли, Массачусетс, США). Мы использовали 14 циклов ПЦР для создания библиотеки до отбора гибридов и еще 18 циклов после этого с теми же условиями ПЦР. Одиночные чтения из 76 оснований были сгенерированы на Illumina Genome Analyzer II.Необработанные невыровненные последовательности Illumina в формате SRF (формат чтения последовательности) доступны по ссылке [32].

Разработка и синтез приманки

Мы разработали 11 566 последовательностей приманки (таблица S5 в файле дополнительных данных 5), нацеленных на кодирующую последовательность 887 транскриптов 467 генов, описанных в базе данных NCBI RefSeq. Используемый файл RefSeq содержал 45 376 последовательностей транскриптов из всех человеческих транскриптов NM и XM (загружен из [33] 23 июня 2008 г.). Каждая приманка состояла из 170 оснований, соответствующих последовательности транскриптов, которые она должна была обогатить.Приманки были расположены по всей кодирующей области каждого транскрипта, от 5′ до 3′, таким образом, чтобы все кодирующие основания были покрыты по крайней мере одной приманкой, и чтобы перекрытие между приманками было сведено к минимуму и равномерно распределялось между всеми приманками. Медиана и среднее перекрытие между соседними приманками составляли пять и семь баз соответственно. Там, где существовали гены с несколькими вариантами сплайсинга, приманки были разработаны для каждого варианта сплайсинга независимо, так что было разработано 9 913 уникальных приманок. Приманки были синтезированы компанией Agilent Technologies (Санта-Клара, Калифорния, США) на специальном массиве из 55 000 точек.Чтобы полностью использовать массив, 11 566 приманок были реплицированы так, чтобы были упорядочены по крайней мере две копии каждого олигонуклеотида плюс две копии обратного комплемента каждого олигонуклеотида. Олигонуклеотиды и их обратные комплементы дают одни и те же продукты ПЦР. Таким образом, несмотря на химический синтез смысловых и антисмысловых олигонуклеотидов, в гибридизации присутствовали только смысловые РНК-приманки.

Гибридная селекция

Пятьсот нанограмм библиотеки кДНК K-562 Illumina отбирали, как описано ранее [20], за исключением того, что для приготовления приманки использовали набор MEGAshortscript T7 (Ambion).

Выравнивание последовательностей и покрытие

Отфильтрованные по чистоте [13] чтения 76-меров были выровнены по всем отобранным транскриптам, кодирующим белок, в RefSeq (загружено из [33] 1 марта 2009 г.), позволив до четырех несоответствий, и сопоставлены обратно к своим геномным координатам в эталонном геноме человека (hg18), сохраняя сплайс-соединения. Выравнивание выполняли с помощью инструмента ImperfectLookupTable (ILT) пакета сборки генома ARACHNE [34]. Чтения считались информативными, если все размещения в транскриптах RefSeq происходили из уникального геномного локуса, а следующее лучшее размещение содержало не менее трех дополнительных несоответствий.Покрытие последовательностей определяли отдельно для 5′-UTR, кодирующих последовательностей (CDS) и 3′-UTR.

Идентификация варианта последовательности

Чтобы исключить ложноположительные результаты при вызове мутаций, считывания, выравнивающиеся с транскриптами RefSeq, также выравнивались непосредственно с геномом, и требовалась уникальность как в транскриптоме, так и в геноме. Каждой позиции был присвоен показатель LOD, указывающий на вероятную точность вызова в соответствии с наблюдаемым охватом последовательностей, распределением аллелей и эталонной базой [20].Из 1 085 748 оснований в кодирующей последовательности генов-мишеней 297 693 основания демонстрировали LOD более 5 до гибридной селекции, а 724 211 оснований демонстрировали LOD более 5 после гибридной селекции. Основания, которые не согласовывались с референсным геномом, классифицировались как известные SNP, если они присутствовали в dbSNP [35] (сборка 129), или как новые варианты. Новые варианты отбрасывались, если они встречались в пределах пяти оснований от другого нового варианта (чтобы компенсировать артефакты выравнивания, вызванные вставками), если они наблюдались на считываниях Illumina только в одной ориентации или если они попадали в сегментные дупликации [36].Остальные новые варианты были признаны высоконадежными и отправлены на проверку (см. далее).

Идентификация изоформ сплайсинга

Для каталогизации соединений экзонов, обнаруженных с помощью RNA-Seq, мы создали базу данных всех гипотетических внутригенных соединений экзонов, включающих гены RefSeq. Каждое чтение из 76-меров выравнивали с этой новой базой данных эталонных последовательностей таким же образом, как описано ранее. Соединения экзонов были «подтверждены» в K-562, если они содержали по крайней мере два различных считывания 76-меров, сопоставленных с соединением, с не более чем четырьмя несовпадениями, но по крайней мере с 10 несовпадениями с их лучшим расположением в геноме.Те гены, по крайней мере с двумя подтвержденными соединениями экзонов, которые перекрывают друг друга (например, один восходящий экзон, соединенный с двумя нижестоящими экзонами, два восходящих экзона, соединенные с одним нижестоящим экзоном, или чередующиеся экзоны) считались альтернативно сплайсированными.

Идентификация транскриптов слияния

Для идентификации слияний генов-кандидатов из отдельных прочтений 76-меров первые 30 и последние 30 оснований были отдельно сопоставлены со всеми выбранными транскриптами, кодирующими белок, в RefSeq (допуская до двух несоответствий).Прочтения, в которых оба конца картированы с отдельными генами, были помечены для дальнейшего анализа. Пары генов, вовлеченные по крайней мере в два различных чтения (для которых ориентация соответствовала слиянию генов), были номинированы как кандидаты на слияние. Затем во всем наборе 76-мерных прочтений искали случаи соединения любого экзона вышестоящего гена с любым экзоном нижележащего гена через полные 76 оснований, требуя перекрытия по крайней мере 12 оснований с каждым геном. Чтобы с уверенностью назвать пару генов событием слияния, нам потребовались по крайней мере два отдельных экземпляра, которые не могли быть размещены где-либо еще в транскриптоме или геноме.Используемые критерии являются консервативными, чтобы избежать ложноположительного выравнивания транскриптов слияния; могут присутствовать дополнительные транскрипты слияния, но они не обнаруживаются с этими параметрами выравнивания и уровнями покрытия.

Валидация изменений последовательности

Новые SNP, названные RNA-Seq, были подтверждены традиционным двунаправленным секвенированием по Сэнгеру продуктов ПЦР, которые были амплифицированы из 20 нг геномной ДНК K-562 с помощью 35 циклов ПЦР с использованием ДНК-полимеразы Herculase Hotstart (Stratagene, Ла-Хойя, Калифорния, США).

Для транскриптов слияния NUP214-XKR3 и SNHG3-RCC1 PICALM подтверждение было предпринято с помощью секвенирования продуктов ОТ-ПЦР по Сэнгеру. кДНК первой цепи синтезировали из мРНК K-562 со случайными гексамерами (Invitrogen) или ген-специфическими праймерами (Eurofins MWG Operon, Huntsville, AL, USA), как описано ранее. Для случайного праймирования использовали 1 мкг мРНК и 1,5 мкг случайных гексамеров, а для ген-специфического праймирования использовали 500 нг мРНК и 2 пмоль ген-специфических праймеров.кДНК очищали с использованием 1,8-кратного объема набора Agencourt AMPure PCR Purification. кДНК, содержащие слитые транскрипты, затем амплифицировали с помощью 30–40 циклов ПЦР с использованием 1/50 очищенной кДНК первой цепи, 25 пмоль прямого и обратного ген-специфических праймеров, 100 мкмоль бетаина (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури). США) и Phusion Master Mix с буфером GC (New England BioLabs, Ипсвич, Массачусетс, США) в объеме 50 мкл. Продукты ПЦР подвергали гель-очистке из геля 10% TBE Criterion (BioRad, Hercules, CA, USA).Срезы геля вырезали, измельчали ​​и элюировали 250 мкл 0,3 М NaCl в течение более 4 часов с последующим осаждением этанолом. Очищенные продукты ПЦР секвенировали, как описано ранее, и сравнивали с соединениями, идентифицированными с помощью секвенирования Illumina. Все последовательности праймеров доступны по запросу.

Сокращения

CDS: кодирующая последовательность; ХМЛ: хронический миелоидный лейкоз; ILT: несовершенная таблица поиска; MIP: зонд молекулярной инверсии; SRF: формат чтения последовательности.

Вклад авторов

JZL и MFB написали статью.XA, AM, AG, CN и LAG помогали в редактировании статьи. MFB выбрала целевые гены, а TF разработала приманки. XA готовил библиотеки кДНК Illumina. PR и AM провели гибридную селекцию. MFB и JZL проанализировали данные последовательности. XA и AG подтвердили слитые транскрипты и SNP соответственно. JZL, CN, LAG и AG разработали и руководили исследованием.

Дополнительные файлы данных

Следующие дополнительные данные доступны с онлайн-версией этой статьи: таблица, в которой перечислены имена генов-приманок и инвентарные номера транскриптов (дополнительный файл данных 1), таблица, в которой перечислены новые SNP (дополнительный файл данных 2). , таблицу, в которой перечислены сплайс-соединения (дополнительный файл данных 3), таблицу, в которой Illumina считывает транскрипты слияния (дополнительный файл данных 4), и таблицу, в которой перечислены последовательности приманок (дополнительный файл данных 5).

Дополнительный материал

Дополнительный файл данных 1:

Имена генов приманки и номера вступления в транскрипт

Дополнительный файл данных 2:

Новые SNPS

Дополнительные файлы данных 3:

Спик -штук

.

Illumina считывает слитые транскрипты

Дополнительный файл данных 5:

Последовательности-приманки

Благодарности

Мы благодарим сотрудников Платформы секвенирования генома Института Броуда за создание данных секвенирования.Мы благодарны за помощь Террансу Ши и Саре Янг с SNP. Эта работа была поддержана грантом HG03067-05 Национального института исследования генома человека, Раковым консорциумом Starr (LAG) и грантом Национального института здравоохранения DP2OD002750 (LAG).

Ссылки

  • Холт Р.А., Джонс С.Дж. Новая парадигма секвенирования проточной кюветы. Геном Res. 2008; 18: 839–846. doi: 10.1101/gr.073262.107. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Ван З., Герштейн М., Снайдер М.RNA-Seq: революционный инструмент для транскриптомики. Нат Рев Жене. 2009; 10:57–63. doi: 10.1038/nrg2484. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Maher CA, Kumar-Sinha C, Cao X, Kalyana-Sundaram S, Han B, Jing X, Sam L, Barrette T, Palanisamy N, Chinnaiyan AM . Секвенирование транскриптома для обнаружения слияния генов при раке. Природа. 2009; 458:97–101. doi: 10.1038/nature07638. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Чжао К., Кабальеро О.Л., Леви С., Стивенсон Б.Дж., Исели С., де Соуза С.Дж., Галанте П.А., Бусам Д., Леверша М.А., Чадалавада К., Роджерс Ю.Х. , Вентер Дж. К., Симпсон А. Дж., Штраусберг Р. Л.Направляемая транскриптомом характеристика геномных перестроек в клеточной линии рака молочной железы. Proc Natl Acad Sci USA. 2009; 106: 1886–1891. doi: 10.1073/pnas.0812945106. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • McLendon R, Friedman A, Bigner D, Van Meir EG, Brat D, Mastrogianakis GM, Olson JJ, Mikkelsen T, Lehman N, Aldape K, Yung WK , Боглер О., Вайнштейн Дж. Н., ВанденБерг С., Бергер М., Прадос М., Музни Д., Морган М., Шерер С., Сабо А., Назарет Л., Льюис Л., Холл О., Чжу И., Рен И., Альви О., Яо Дж., Хоуз А., Джхангиани С., Фаулер Г.Всесторонняя геномная характеристика определяет гены глиобластомы человека и основные пути. Природа. 2008; 455:1061–1068. doi: 10.1038/nature07385. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Коллинз Ф.С., Баркер А.Д. Картирование генома рака: точное определение генов, участвующих в раке, поможет наметить новый курс в сложном ландшафте злокачественных новообразований человека. наук Ам. 2007; 296: 50–57. doi: 10.1038/scientificamerican0307-50. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Атлас генома рака. http://канцергеном.nih.gov/
  • Rabbitts TH. Общность, но разнообразие слияний генов рака. Клетка. 2009; 137: 391–395. doi: 10.1016/j.cell.2009.04.034. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Campbell PJ, Stephens PJ, Pleasance ED, O’Meara S, Li H, Santarius T, Stebbings LA, Leroy C, Edkins S, Hardy C, Teague JW, Menzies A, Гудхед И., Тернер Д.Дж., Кли С.М., Куэйл М.А., Кокс А., Браун С., Дурбин Р., Херлс М.Э., Эдвардс П.А., Бигнелл Г.Р., Стрэттон М.Р., Футреал П.А. Идентификация соматически приобретенных перестроек при раке с использованием полногеномного массивно-параллельного секвенирования парных концов.Нат Жене. 2008;40:722–729. doi: 10.1038/ng.128. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Hampton OA, Den Hollander P, Miller CA, Delgado DA, Li J, Coarfa C, Harris RA, Richards S, Scherer SE, Muzny DM, Gibbs RA , Lee AV, Milosavljevic A. Карта хромосомных точек разрыва на уровне последовательности в клеточной линии рака молочной железы MCF-7 дает представление об эволюции генома рака. Геном Res. 2009; 19: 167–177. doi: 10.1101/gr.080259.108. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Maher CA, Palanisamy N, Brenner JC, Cao X, Kalyana-Sundaram S, Luo S, Khrebtukova I, Barrette TR, Grasso C, Yu J, Lonigro Р.Дж., Шрот Г., Кумар-Синха С., Чиннайян А.М.Обнаружение химерных транскриптов путем секвенирования парных концов транскриптома. Proc Natl Acad Sci USA. 2009;106:12353–12358. doi: 10.1073/pnas.0

    0106. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

  • Mortazavi A, Williams BA, McCue K, Schaeffer L, Wold B. Картирование и количественная оценка транскриптомов млекопитающих с помощью RNA-Seq. Нат Методы. 2008; 5: 621–628. doi: 10.1038/nmeth.1226. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Bentley DR, Balasubramanian S, Swerdlow HP, Smith GP, Milton J, Brown CG, Hall KP, Evers DJ, Barnes CL, Bignell HR, Boutell JM, Bryant J, Carter RJ , Кира Читэм Р., Кокс А.Дж., Эллис Д.Дж., Флэтбуш М.Р., Гормли Н.А., Хамфри С.Дж., Ирвинг Л.Дж., Карбелашвили М.С., Кирк С.М., Ли Х, Лю Х, Майзингер К.С., Мюррей Л.Дж., Обрадович Б., Ост Т., Паркинсон М.Л., Пратт МР.Точное секвенирование всего генома человека с использованием химии обратимых терминаторов. Природа. 2008; 456:53–59. doi: 10.1038/nature07517. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Porreca GJ, Zhang K, Li JB, Xie B, Austin D, Vassallo SL, LeProust EM, Peck BJ, Emig CJ, Dahl F, Gao Y, Church GM, Shendure J. Мультиплексная амплификация больших наборов экзонов человека. Нат Методы. 2007; 4: 931–936. doi: 10.1038/nmeth2110. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Кришнакумар С., Чжэн Дж., Вильгельми Дж., Фахам М., Миндринос М., Дэвис Р.Комплексный анализ для целенаправленной мультиплексной амплификации последовательностей ДНК человека. Proc Natl Acad Sci USA. 2008; 105:9296–9301. doi: 10.1073/pnas.0803240105. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Turner EH, Lee C, Ng SB, Nickerson DA, Shendure J. Массивный параллельный захват экзонов и повторное секвенирование 16 геномов без использования библиотек. Нат Методы. 2009; 6: 315–316. doi: 10.1038/nmeth.f.248. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Okou DT, Steinberg KM, Middle C, Cutler DJ, Albert TJ, Zwick ME.Геномная селекция на основе микрочипов для высокопроизводительного ресеквенирования. Нат Методы. 2007; 4: 907–909. doi: 10.1038/nmeth2109. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Albert TJ, Molla MN, Muzny DM, Nazareth L, Wheeler D, Song X, Richmond TA, Middle CM, Rodesch MJ, Packard CJ, Weinstock GM, Gibbs RA. Прямая селекция геномных локусов человека с помощью микрочиповой гибридизации. Нат Методы. 2007; 4: 903–905. doi: 10.1038/nmeth2111. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Hodges E, Xuan Z, Balija V, Kramer M, Molla MN, Smith SW, Middle CM, Rodesch MJ, Albert TJ, Hannon GJ, McCombie WR.Полногеномный захват экзона in situ для селективного повторного секвенирования. Нат Жене. 2007; 39: 1522–1527. doi: 10.1038/ng.2007.42. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Гнирке А., Мельников А., Магуайр Дж., Рогов П., ЛеПруст Э.М., Брокман В., Феннелл Т., Яннукос Г., Фишер С., Расс С., Габриэль С., Джаффе Д.Б., Ландер Э.С. , Nusbaum C. Гибридная селекция растворов со сверхдлинными олигонуклеотидами для массивно-параллельного целевого секвенирования. Нац биотехнолог. 2009; 27: 182–189. doi: 10.1038/nbt.1523. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Futreal PA, Coin L, Marshall M, Down T, Hubbard T, Wooster R, Rahman N, Stratton MR.Перепись генов рака человека. Нат Рев Рак. 2004; 4: 177–183. doi: 10.1038/nrc1299. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Yassour M, Kaplan T, Fraser HB, Levin JZ, Pfiffner J, Adiconis X, Schroth G, Luo S, Khrebtukova I, Gnirke A, Nusbaum C, Томпсон Д.А., Фридман Н., Регев А. Ab initio построение эукариотического транскриптома путем массивно-параллельного секвенирования мРНК. Proc Natl Acad Sci USA. 2009;106:3264–3269. doi: 10.1073/pnas.0812841106. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Wu SQ, Voelkerding KV, Sabatini L, Chen XR, Huang J, Meisner LF.Обширная амплификация генов слияния bcr/abl, сгруппированных на трех маркерных хромосомах в линии лейкозных клеток человека K-562. Лейкемия. 1995; 9: 858–862. [PubMed] [Google Scholar]
  • Graux C, Cools J, Melotte C, Quentmeier H, Ferrando A, Levine R, Vermeesch JR, Stul M, Dutta B, Boeckx N, Bosly A, Heimann P, Uyttebroeck A, Mentens N , Somers R, MacLeod RA, Drexler HG, Look AT, Gilliland DG, Michaux L, Vandenberghe P, Wlodarska I, Marynen P, Hagemeijer A. Слияние NUP214 с ABL1 на амплифицированных эписомах при остром Т-клеточном лимфобластном лейкозе.Нат Жене. 2004; 36: 1084–1089. doi: 10.1038/ng1425. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Quentmeier H, Schneider B, Rohrs S, Romani J, Zaborski M, Macleod RA, Drexler HG. Слияние SET-NUP214 в клеточных линиях, полученных из острого миелоидного лейкоза и Т-клеточного острого лимфобластного лейкоза. J Гематол Онкол. 2009;2:3. doi: 10.1186/1756-8722-2-3. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Herman DS, Hovingh GK, Iartchouk O, Rehm HL, Kucherlapati R, Seidman JG, Seidman CE. Захват субгеномов гибридизацией на основе фильтров позволяет повторно секвенировать и определять количество копий.Нат Методы. 2009; 6: 507–510. doi: 10.1038/nmeth.1343. [Статья бесплатно PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Li H, Wang J, Mor G, Sklar J. Слияние неопластических генов имитирует транс-сплайсинг РНК в нормальных клетках человека. Наука. 2008; 321:1357–1361. doi: 10.1126/science.1156725. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Li JB, Levanon EY, Yoon JK, Aach J, Xie B, Leproust E, Zhang K, Gao Y, Church GM. Полногеномная идентификация сайтов редактирования РНК человека путем параллельного захвата и секвенирования ДНК.Наука. 2009; 324:1210–1213. doi: 10.1126/science.1170995. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Zhang K, Li JB, Gao Y, Egli D, Xie B, Deng J, Li Z, Lee JH, Aach J, Leproust EM, Eggan K, Church GM. Цифровое аллелотипирование РНК выявляет тканеспецифическую и аллель-специфическую экспрессию генов у человека. Нат Методы. 2009; 6: 613–618. doi: 10.1038/nmeth.1357. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Soares MB, Bonaldo MF, Jelene P, Su L, Lawton L, Efstratiadis A. Создание и характеристика нормализованной библиотеки кДНК.Proc Natl Acad Sci USA. 1994; 91: 9228–9232. doi: 10.1073/pnas.91.20.9228. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Жулидов П.А., Богданова Е.А., Щеглов А.С., Вагнер Л.Л., Хаспеков Г.Л., Кожемяко В.Б., Мац М.В., Мелешкевич Е., Мороз Л.Л., Лукьянов С.А., Шагин Д.А. Простая нормализация кДНК с использованием дуплекс-специфичной нуклеазы камчатского краба. Нуклеиновые Кислоты Res. 2004;32:e37. doi: 10.1093/nar/gnh031. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Broad Institute Targeted RNA-Seq Sequence Data.http://www.broad.mit.edu/annotation/cDNA/cDNA.html
  • FTP-сайт NCBI RefSeq мРНК человека. ftp://ftp.ncbi.nih.gov/refseq/H_sapiens/mRNA_Prot/
  • Джаффе Д.Б., Батлер Дж., Гнерре С., Маусели Э., Линдблад-Тох К., Месиров Дж.П., Зоди М.С., Ландер Э.С. Сборка полногеномных последовательностей для геномов млекопитающих: Arachne 2. Genome Res. 2003; 13:91–96. doi: 10.1101/gr.828403. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Шерри С.Т., Уорд М.Х., Холодов М., Бейкер Дж., Фан Л., Смигельский Э.М., Сироткин К.dbSNP: база данных генетической изменчивости NCBI. Нуклеиновые Кислоты Res. 2001; 29: 308–311. doi: 10.1093/нар/29.1.308. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Bailey JA, Yavor AM, Massa HF, Trask BJ, Eichler EE. Сегментные дупликации: организация и влияние в текущей сборке проекта генома человека. Геном Res. 2001; 11:1005–1017. doi: 10.1101/gr.GR-1871R. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

Лечение лейкемии может приманивать и захватывать клетки в укрытиях, исследования Уилмота показывают

трехэтапный процесс с использованием передовых технологий для захвата, захвата и уничтожения лейкозных клеток в самом их корне.

В статье, опубликованной в журнале Sciences Advances под руководством исследователей Института рака Уилмота, описывается процесс и значение для пациентов, страдающих острым миелоидным лейкозом (ОМЛ), агрессивным типом рака крови, при котором только 28 процентов людей выживают в течение пяти лет. .

Несмотря на то, что исследование находится на ранней стадии — оно было протестировано только на мышах и в культурах клеток человека — оно сильно отличается от стандартных методов, таких как химиотерапия, потому что позволяет ученым проводить лечение, которое может исправить дефектные гены, которые подпитывают рак, сказал Цзы-Чие. (Кейт) Хо, доктор философии.Д., первый автор статьи и доцент кафедры гематологии/онкологии в Уилмоте.

Ее наставник, Майкл Беккер, доктор медицинских наук, декан-профессор гематологии/онкологии в Уилмоте, является соавтором.

Система

Хо для достижения причины лейкемии использует технологию CRISPR, которая может редактировать гены внутри клетки. В статье она описывает новый способ выманивания из укрытия стволовых клеток лейкемии, а затем их уничтожения комплексом белок-РНК, который проникает в ядро ​​раковых клеток и редактирует их так, что они не могут выжить.

Важно иметь возможность нацеливаться на стволовые клетки лейкемии; болезнь, как известно, рецидивирует даже после длительной ремиссии, поскольку стволовые клетки пробуждаются от покоя. По этой причине современная наука ориентируется на использование самых передовых материалов для поиска и прямого уничтожения популяции стволовых клеток.

Когда несколько лет назад Хо проводила исследование для получения докторской степени в Медицинском центре Университета Рочестера, она обнаружила важный белок, IL-1RAP, на поверхности клеток, инициирующих лейкемию, который может быть мишенью для противораковых препаратов.

Хо перешел в Мемориал Слоана Кеттеринга и Колумбийский университет в Нью-Йорке для разработки инновационных моделей мышей и биомедицинских инженерных материалов, которые могут более эффективно доставлять лекарства непосредственно к белковым мишеням, таким как IL 1RAP. Год назад она вернулась в Уилмот, чтобы работать в лаборатории Беккера, которая уже несколько лет изучает популяции стволовых клеток злокачественного лейкоза.

«Мы благодарны доктору Хо и надеемся на более интересные разработки в ближайшем будущем», — сказал Беккер.

До клинических испытаний на пациентах еще пара лет. Исследователи также развивают отношения с фармацевтическими компаниями, чтобы найти агенты, которые могут воздействовать на белок IL-1RAP.

Соавтор — Кам Леонг, доктор философии, сотрудник Колумбийского университета и профессор биомедицинской инженерии Сэмюэля И. Шенга. Дополнительные соавторы из Уилмота: Джон Эштон, доктор философии, магистр делового администрирования, директор Исследовательского центра геномики Рочестерского университета, и Кэл Палумбо, магистр наук, из Исследовательского центра геномики.

Крошечные ловушки приманивают раковые клетки для диагностики и мониторинга лечения

Выявление рака на ранних стадиях остается серьезной проблемой в онкологии. Даже отслеживать прогрессирование рака сложно, но исследователи из Мичиганского университета придумали крошечное имплантируемое устройство, которое может притягивать к себе раковые клетки для анализа экспрессии генов.

Микроскопическое устройство представляет собой каркас из биоматериала, предназначенный для размещения внутри новых клеток.Циркулирующие опухолевые клетки, наиболее приспособленные к поиску свежих укромных уголков, быстро захватываются каркасным устройством.

Такие имплантаты могут быть размещены прямо под кожей с помощью простой процедуры, а наличие даже отдаленных видов рака, например рака легких, может быть обнаружено путем биопсии имплантата, а не ткани легкого.

На данный момент эти устройства были опробованы на лабораторных мышах с раком, и исследователи из Университета штата Массачусетс смогли проанализировать экспрессию 635 генов в клетках, захваченных с помощью имплантатов.Этого анализа было достаточно, чтобы эффективно диагностировать мышей и предсказать течение их болезни.

Важно отметить, что этот метод отличается от жидкостной биопсии, при которой циркулирующие опухолевые клетки захватываются в цельной крови. Исследователи обнаружили, что клетки, которые они захватили, имели генетический профиль, отличный от тех, которые были получены с помощью жидкой биопсии. Это указывает на то, что новый метод имеет уникальное полезное диагностическое применение.

Имплантируемые каркасы, по-видимому, сначала привлекают иммунные клетки, а затем опухолевые клетки, и, возможно, даже удастся обнаружить рак, вообще не захватывая раковые клетки.

«Когда мы начинали, идея заключалась в том, что мы будем делать биопсию каркаса и искать опухолевые клетки, которые следовали там за иммунными клетками», — сказал Ши. «Но мы поняли, что, анализируя иммунные клетки, которые собираются первыми, мы можем обнаружить рак до того, как он распространится».

Более того, поскольку устройства улавливают циркулирующие опухолевые клетки, у этих распространяющих рак клеток нет возможности запускать новые места метастазирования в других местах. Это уже было показано в исследовании на мышах с опухолями рака молочной железы.Таким образом, новые имплантаты носят не только диагностический характер, но и могут использоваться для замедления распространения рака.

Исследование в журнале Cancer Research : Метастатическое кондиционирование миелоидных клеток в подкожной синтетической нише отражает прогрессирование заболевания и прогнозирует терапевтические результаты

Изображение предоставлено Стивом Алви, Michigan Engineering

.

Через: Мичиганский университет

«Рыбалка для лечения» собирает 67 000 долларов на исследования детского рака

BRACEVILLE, Ill.90 156 Сотрудники станции Брейдвуд собрали рекордные 67 000 долларов на исследования детского рака в Детской больнице Энн и Роберта Х. Лурье в Чикаго в субботу, 7 мая во время ежегодного турнира по ловле окуня «Рыбалка для лечения». Это побило предыдущий рекорд — 65 000 долларов, собранных в 2014 году для жертв торнадо в Коал-Сити.

Знаменитая благотворительная акция станции Брейдвуд с момента ее начала в 2002 году собрала 627 000 долларов для местных благотворительных организаций.Дэниелс потерял свою 2-летнюю дочь Эшлин из-за эпилепсии в 2002 году, а 20-летний сын Капа, Логан, до сих пор страдает муковисцидозом. Оба ребенка получали лечение и уход в Лурьевской детской больнице.

«Мы очень рады видеть огромную поддержку со стороны Exelon Generation, наших коллег, поставщиков и местных предприятий в честь наших семей», — сказал Дэниелс. «Мы хотим помочь бороться с раком и болезнями, которые поражают детей, и это пожертвование будет иметь значение».

«Рыбалка для лечения», знаковая благотворительная акция станции Брейдвуд, собрала 620 000 долларов с 2002 года, когда она была запущена как способ поприветствовать рыболовов на охлаждающемся озере станции Брейдвуд.Exelon оплачивает все расходы по организации мероприятия, и 100 процентов денег, собранных за счет вступительных взносов, розыгрышей сотрудников и пожертвований, направляются непосредственно в выбранную в этом году благотворительную организацию.

«Какой фантастический рыболовный турнир с выдающимися результатами для исследований, проводимых каждый день в Детской больнице Лурье», — сказала Рэйчел Мэйхью, координатор корпоративного партнерства в Детском фонде Лурье. «Спасибо Exelon Generation и всем сотрудникам Braidwood Station, которые много работали в прошлом году, чтобы собрать 60 000 долларов.»

Первое место в благотворительном командном басовом турнире заняли Митч Делэнд и Дэн Марколини, оба из Плейнфилда. Мэтт Леймбах из Брейдвуда и Ник Студеманн из Морриса заняли второе место, а команда отца и сына Нила и Джастина Роминес из Морриса заняла третье место.

Ранее в тот же день на пруду в районе Годли-Парк состоялось Детское рыболовное дерби Exelon

Местными спонсорами турнира были City of Braidwood, Reactor Services Inc., Allied Power, Angelo’s Bait Shop (Wilmington), Berkot’s Super Foods, Brieser Construction, Midwest Mechanical, Monical’s Pizza, Northern Illinois Steel Supply Co.и Rachke Piping and Mechanical.

Генераторная станция Брейдвуд — одна из шести высокоэффективных ядерных установок в Иллинойсе, принадлежащих и управляемых Exelon Generation, и обеспечивает безуглеродным и надежным электричеством более двух миллионов жителей и предприятий. Брейдвуд расположен в 20 милях к юго-западу от Джолиета, штат Иллинойс, и производит безуглеродную электроэнергию с 1988 года. Почти половина электроэнергии Иллинойса и более 90 процентов безуглеродной энергии Иллинойса вырабатывается атомными электростанциями Exelon Generation. .

Посмотрите фотографии!

Сотрудники станции Брейдвуд, члены их семей и другие волонтеры позируют с представителями Детской больницы Энн и Роберта Х. Лурье в Чикаго с крупным чеком на 60 000 долларов, собранным во время благотворительного турнира по ловле окуня «Рыбалка для лечения» в 2019 году.

Лодки незадолго до начала турнира по ловле окуня на озере Брейдвуд в начале турнира по рыбалке для взрослых.


Рыболов ловит крупного окуня у южного склона озера на фоне станции Брейдвуд.

Дети ловят рыбу на берегу пруда Годли во время детского рыболовного дерби. Exelon заселяет пруд сомом за несколько дней до мероприятия.

Победители детского дерби Итан Николс (самая маленькая рыба) и Рилин Дайггер (самая большая рыба) позируют с Чонси Низиолом из ESPN Radio на обеде после церемонии награждения после дерби.

 

Сотрудники станции Брейдвуд взвешивают крупного окуня после турнира для взрослых.


Победители Митч Деланд и Дэн Марколини позируют со своими трофеями и деньгами за поимку самого крупного окуня турнира. Пара выиграла приз за первое место в размере 4000 долларов. Exelon оплачивает все расходы на турнир, в том числе 10 000 долларов призовых, поэтому все собранные деньги могут быть направлены непосредственно на благотворительность, выбранную сотрудниками. Дэн Марколини, оба из Плейнфилда.

  • Мэтт Леймбах из Брейдвуда и Ник Студеманн из Морриса
  • Нил и Джастин Роминес из Морриса
  • Дэйв Беренс из Минука и Ник Олсон из Морриса.
  • Дэйв и Мелисса Сандерс из Monee
  • Фрэнсис Моннетт из Willowbrook и Чак Сабиа из Channahon
  • Руфус и Джейсон Эскью из Joliet и Willow Springs
  • Роберт и Шон Кук из Joliet
  • Рэй Косентино и Том Лебеда 90 оба из Вилли Томпсон из Momence и Эндрю Элизондо из Peotone.
  • (PDF) Использование транскрипционных подписей для поиска факторов, вызывающих рак, с помощью LURE

    Ссылки

    1. B. Vogelstein et al., Science (Нью-Йорк, штат Нью-Йорк) 339, 1546 (март 2013 г.).

    2. K.A. Hoadley et al., Cell 173, 291 (апрель 2018 г.).

    3. Н. Агравал и др., Cell 159, 676 (октябрь 2014 г.).

    4. A. Gonzalez-Perez et al., Nature method 10, 723 (август 2013 г.).

    5. Т. Абениус и др., Достижения в области системной биологии, ред. И. И. Горянин и А.Горячев Б. Ад-

    достижений в области экспериментальной медицины и биологии (Springer New York, 2012).

    6. Башашати А. и др., Биология генома 13, с. Р124 (2012).

    7. M.D. Leiserson et al., Genome Biology 16 (2015).

    8. G. Ciriello и др., Текущие протоколы в биоинформатике ГЛАВА 8, Unit (март 2013 г.).

    9. S. Takahashi et al., Cancer Science 99, 324 (февраль 2008 г.).

    10. С. Ямагути и др., Oncotarget 9, 14193 (март 2018 г.).

    11.П. А. Константинопулос и др., Журнал клинической онкологии: Официальный журнал Американского общества клинической онкологии

    28, 3555 (август 2010 г.).

    12. J.G. Tate et al., Nucleic Acids Research.

    13. A. Subramanian et al., Proceedings of the National Academy of Sciences 102, 15545 (октябрь

    2005).

    14. Вазирани В. В. Аппроксимационные алгоритмы, исправленное второе изд. (Springer, Berlin Hei-

    delberg, 2003). OCLC: 24

    72.

    15. С. Туркан и др., Nature 483, 479 (март 2012 г.).

    16. Исследовательская сеть Атласа генома рака и др., The New England Journal of Medicine 372, 2481

    (июнь 2015 г.).

    17. А. Г. Робертсон и др., Раковая клетка 32, 204 (август 2017 г.).

    18. S. Alsafadi et al., Nature Communications 7, p. 10615 (февраль 2016 г.).

    19. Т. Сайто и М. Ремсмайер, PLoS ONE 10 (2015).

    20. D. Merico et al., PloS One 5, p. e13984 (ноябрь 2010 г.).

    21. P. Shannon et al., Genome Research 13, 2498 (ноябрь 2003 г.).

    22. A. Persad et al., Genes & Cancer 7, 368 (ноябрь 2016 г.).

    23. Шинде С.Р., Маддика С., Nature Communications 7, p. 10689 (февраль 2016 г.).

    24. Дж. В. Шей и У. Э. Райт, Nature Reviews. Молекулярно-клеточная биология 1, 72 (2000).

    25. Дж. Д. Хенсон и Р. Р. Реддел, Письма FEBS 584, 3800 (сентябрь 2010 г.).

    26. C. M. Heaphy et al., The American Journal of Pathology 179, 1608 (октябрь 2011 г.).

    27. C.A. Lovejoy et al., PLOS Genet 8, p. e1002772 (июль 2012 г.).

    28. Д. М. Браун и др., BMC Genetics 19 (май 2018 г.).

    29. Ю.-Ж. Chen et al., Cancer Research 66, 6473 (июль 2006 г.).

    30. Медицинский журнал Новой Англии 372, 2481 (июнь 2015 г.).

    31. Ф. П. Бартель и др., Nature Genetics 49, 349 (март 2017 г.).

    32. M. Garca-Cao et al., Nature Genetics 32, p. 415 (ноябрь 2002 г.).

    33. В.-К. Цзян и др., Molecular and Cellular Biology 25, 2708 (апрель 2005 г.).

    34. R.T. Lawlor et al., BMC Cancer 19, p. 232 (март 2019 г.).

    35. А. Фернндес-Медарде и Э. Сантос, Genes & Cancer 2, 344 (март 2011 г.).

    36. А. Лобода и др., BMC Medical Genomics 3, p. 26 (июнь 2010 г.).

    37. Г. П. Уэй и др., Cell Reports 23, 172 (апрель 2018 г.).

    38. F. Sanchez-Vega et al., Cell 173, 321 (апрель 2018 г.).

    39. H. Zhou et al., Digestive Diseases and Sciences 61, 1972 (июль 2016 г.).

    40. C. Rosenberg et al., в 2005 г. Седьмой семинар IEEE по приложениям компьютерного зрения

    (WACV/MOTION’05) — том 1, январь 2005 г.

    41. Дж. В. Ким и др., Nature Biotechnology 34, 539 (май 2016 г.).

    .CC-BY-NC-ND 4.0 Международная лицензия. Он доступен по лицензии

    .

    (которая не прошла рецензирование) является автором/спонсором, предоставившим bioRxiv лицензию на бессрочное отображение препринта.

    Владелец авторских прав на этот препринт. http://dx.doi.org/10.1101/727891doi: препринт bioRxiv, впервые размещенный в сети в августе.8, 2019;

    Местные жители запускают проект «Рыбалка для борьбы с раком» в пользу детей Сент-Джуд

    Еще один удивительный северянин собирает деньги для Детской исследовательской больницы Сент-Джуд, дело, близкое нашему сердцу в Townsquare Media.

    Люди со всего Севера каждый год помогают собирать деньги на благотворительность. Гарольд и его семья в Карлтоне — отличный тому пример. Они прославились на всю округу своими веселыми мероприятиями, на которые собираются тысячи людей.

    Каждый год они проводят несколько популярных мероприятий, вырученные средства от которых идут нуждающимся семьям в больнице Св.Джуд. Эти крупные события включают в себя схватку за гольф Гарольда, фиаско Гарольда с переворотом и ежегодный сбор средств на рождественскую елку.

    В 2021 году Гарольд и его семья собрали рекордную сумму для Детской исследовательской больницы Святого Иуды. Они собрали более 40 000 долларов США. Они невероятная семья в невероятном сообществе.

    Сейчас Джастин Гауэр делает то же самое, но уже не первый год. В прошлом году он провел онлайн-аукцион в последнюю минуту. Он владеет компанией JG Custom Lures LLC и выставил на аукцион пять своих популярных рыболовных приманок.Он также объединился с владельцем другой компании, чтобы выставить на аукцион приманку.

    Результат? 2230 долларов для Детской исследовательской больницы Святого Иуды. После успеха мероприятия он пообещал вернуться в 2022 году, и он вернулся с веселым мероприятием, которое начнется во вторник, 1 февраля.

    Со вторника вечером по пятницу (4 февраля) Гауэр будет прыгать на Facebook в прямом эфире и рисовать живые приманки. Он запрыгнет на Facebook в 19:30.м. каждую ночь и каждый вечер какое-то время рисует.

    На следующей неделе, либо в понедельник, 7-го, либо во вторник, 8-го, Гауэр проведет живой аукцион. Все приманки, которые он раскрасил на этой неделе, и предметы, которые он собрал у малого бизнеса, будут выставлены на продажу, а вырученные средства пойдут на пользу Сент-Джуду.

    Некоторые из тех предприятий, которые вносят свой вклад, включают; Slik Baits, Crossroad Custom, Jared’s Jigs, Etched, Bojangles Baits и Hi Tech Custom Painted Baits.

    Чтобы посмотреть картину каждую ночь и получить доступ к живому аукциону, вы можете следить за приключениями Гауэра на официальной странице мероприятия в Facebook.Находясь на странице, вы можете просмотреть предварительный просмотр того, что будет выставлено на аукцион, и то, на что вы можете сделать ставку на следующей неделе. Вы также можете оставить Гауэру слова поддержки!

    Гауэр говорит, что его вдохновила потеря школьного друга-подростка. После прослушивания ежегодного Radiothon B105 для St. Jude он был вдохновлен и захотел сделать пожертвование. Он сделал еще лучше и организовал это специальное мероприятие, чтобы собрать еще больше денег для дела.

    Он сказал мне, что надеется собрать больше денег, чем в прошлом году, и что даже помощь одной семье деньгами, которые он собирает, будет для него очень много значить.Давайте поможем детям в Детской исследовательской больнице Св. Джуда.

    Артисты кантри в St. Jude на протяжении многих лет:

    См. Звезды кантри, которые знают #StJudeWontStop

    Операция против рака Мэтта вернуться к тому, чтобы быть свободным от рака! Они нашли пятно до того, как оно дало метастазы (распространение). В середине декабря ему сделали операцию Мооса, и он готов вернуться на воду. Мы рассказываем вам о его ситуации не из жалости, мы рассказываем вам, потому что хотим, чтобы вы позаботились о себе! Многие рыболовы не воспринимают рак кожи всерьез, и чтобы их встряхнуть, требуется шок рядом с домом.Мы надеемся, что столкновение Мэтта с раком достаточно близко, чтобы вы отнеслись к этому серьезно!

    Рак кожи не всегда очевиден. Конечно, это может быть большое пятно на вашем лице, которое меняет цвет, и его нельзя игнорировать. Это может быть родинка, которая внезапно меняет размер, форму или цвет. Но гораздо более вероятно, что это будет корка, которая не исчезнет, ​​или даже просто сухое пятно, когда кожа будет похожа на наждачную бумагу.

    Как бы это ни выглядело, «другое» на вашей коже не является хорошим признаком, и вам необходимо обратиться к дерматологу.Рак кожи хорошо поддается лечению, если вы обнаруживаете его на ранней стадии, но чрезвычайно смертелен, если вы ждете. Если вам интересно, пришло время войти. Пусть история Мэтта вдохновит вас поступить правильно и позаботиться о себе, пока еще есть время. Для младших рыболовов найдите время, чтобы прикрыться сейчас, это избавит вас от многих проблем позже.

    Ниже мы собрали различные солнцезащитные предметы одежды, которые помогут защитить вас от солнца. От солнцезащитных рубашек с длинными рукавами, которые невероятно круты даже летом, до масок и перчаток.Отнеситесь к этому серьезно и прикройте, чтобы потом вам не пришлось идти по этой неровной дороге. Мы также включили названия нескольких тонированных солнцезащитных кремов на основе цинка, которые добавят еще один уровень защиты между вами и солнечными лучами.


    Tactical Sun Gear… 

    -TacticalBassin Samurai Sunshirt с капюшоном: http://bit.ly/38cVi9G

    -TacticalBassin Samurai Sunshirt: http://bit.ly/2TvFMBD

    2 90 Our Favorites Средства защиты от солнца… 

    Солнцезащитная маска-Aftco Nukam: http://bit.ly/2MfwxDY

    Солнцезащитные перчатки — Aftco SolPro Glove: http://bit.ly/2X38BWs

    Солнцезащитные штаны — Aftco Original Fishing Pant: http://bit.ly/2foDx10

    All-Brands Sun Protection…
    Солнцезащитные рубашки всех брендов: http://bit.ly/383JTM1

    Солнцезащитные перчатки всех брендов: http://bit.ly/3huOPNg

    Защита головы и шеи всех брендов: http://bit.ly/380ZagO


    Солнцезащитные средства, которыми мы были довольны (без конкретного заказа)…

    -Elta MD Broad Spectrum Tinted SPF 41

    -La Roche-Posay Anthelios SPF 60

    -Cotz Flawless Complexion Tinted Mineral Sunscreen SPF 50

    ________________________________________________________________

    Хотите одежду TacticalBassin?

    У нас есть множество предметов одежды и приманок индивидуального дизайна! Все, от шляп до толстовок и воблеров! Все это доступно напрямую через Tackle Warehouse с быстрой доставкой.См. здесь… 

    Одежда и дизайн TacticalBassin: http://bit.ly/38YpPIz

    .

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.